大白菜小孢子再生植株的遺傳分析.pdf

1、大白菜是中國栽培蔬菜中分布最廣、種植面積最大的蔬菜作物之一.中國的大白菜品種與類型十分豐富,但綜合的高抗、豐產(chǎn)品種比較少.利用游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)開展大白菜育種工作是目前研究者十分關(guān)注的.小孢子是減數(shù)分裂后四分體釋放出的單核雄配子體細(xì)胞,它能提高隱性基因的重組選擇效率,加倍后的雙單倍體有利于選育出性狀優(yōu)良的單株.分子標(biāo)記能直接從DNA水平上反映各材料間的遺傳差異,是研究生物遺傳多樣性的有力工具.RAPD標(biāo)記具有簡單、快速和無種屬特異性的優(yōu)

2、點,在遺傳背景未知的情況下,可廣泛用于遺傳多樣性和種質(zhì)分類研究.該研究中,RAPD標(biāo)記結(jié)合系統(tǒng)聚類分析,對50份大白菜小孢子植株材料的遺傳多樣性進(jìn)行研究,主要結(jié)果如下:1、通過觀察大白菜小孢子胚的發(fā)育過程,發(fā)現(xiàn)小孢子胚經(jīng)歷了二分體時期、四分體時期和多細(xì)胞團(tuán)和子葉型胚.并獲得了華陽3號(HY)、豐抗70(KF)、魯白(LB)三個基因型的小孢子植株200多株,加倍后獲得雙單倍體植株,種植于田間.2、通過HYH<,1>代的花期與蕾期授粉實驗結(jié)

3、果表明,HY大白菜小孢子植株是自交不親和植株,其自花結(jié)實率極低,只有極少數(shù)的植株通過花期授粉得到了種子.通過蕾期授粉,發(fā)現(xiàn)植株的親和指數(shù)不高,親和指數(shù)超過5的植株占群體的43.75﹪,親和指數(shù)最高的為7.02.3、對HYH<,2>代植株的3個田間農(nóng)藝性狀進(jìn)行了鑒定和分析,其平均變異系數(shù)為0.606,變異系數(shù)最高的是株高,其次為周長,最低為外葉數(shù).4、從206條引物中,篩選出了33條引物,將50份大白菜小孢子植株DNA分為了兩組,第一組為

4、HY H<,1>16份、其相應(yīng)的H<,2>16份及HYF<,1>雜交親本,材料共33份,第二組為KF H<,1>及其KFF<,1>雜交親本共材料17份.5、分別進(jìn)行RAPD分析,第一組擴(kuò)增了206條帶,其中多態(tài)性帶為136條,多態(tài)性百分率為66.1﹪,第二組擴(kuò)增了200條帶,其中多態(tài)性帶為120條,多態(tài)性百分率為60﹪.6、將RAPD結(jié)果轉(zhuǎn)化為原始矩陣,并對HY H<,2>代及其HYF<,1>17份種質(zhì)和KF H<,1>代及其KFF<,