天仙子炮制原理初步探討.pdf

1、目的:天仙子為茄科植物莨菪Hyoscyamus niger L.的干燥成熟種子，原稱“莨菪子”，有大毒，具有解痙止痛，安神定痛的功能。主治胃痙攣疼痛、喘咳、癲狂、抗休克、改善微循環(huán)等。近幾年來(lái)，在研究使用過(guò)程中，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)了它多方面的藥理作用和臨床功能?！吨袊?guó)藥典》2005年版收載了天仙子，并未收載其炮制品，為完善天仙子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有必要對(duì)天仙子的炮制工藝進(jìn)行深入的研究，找出一種減毒增效、穩(wěn)定可控、易推廣且適合大生產(chǎn)的炮制工藝。本課題在

2、參考大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，對(duì)天仙子炮制工藝進(jìn)行了研究，優(yōu)選出最佳炮制工藝參數(shù)，為制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)奠定基礎(chǔ)，并為臨床用藥更合理、更有效提供科學(xué)的理論依據(jù)。主要從以下三個(gè)方面對(duì)天仙子進(jìn)行了研究。
　　 材料與方法:在化學(xué)成分研究中，采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)、HPLC法、紫外分光光度法測(cè)定天仙子中各化學(xué)成分在炮制前后的變化情況；藥理實(shí)驗(yàn)研究中首先做急性毒性試驗(yàn)，采用小鼠熱板法和小鼠扭體法觀察其鎮(zhèn)痛作用、二甲苯致小鼠耳廓腫脹法觀察其抗炎作用；最

3、后運(yùn)用正交實(shí)驗(yàn)方法確定了天仙子最佳炮制工藝。
　　 結(jié)果:
　　 1.天仙子生品及炮制品化學(xué)成分比較研究
　　 采用GC-MS朕用技術(shù)，對(duì)天仙子炮制前后揮發(fā)油成分進(jìn)行分析，均分得29個(gè)化合物，清炒品與生品對(duì)比發(fā)現(xiàn)大多數(shù)成分含量均下降，棕櫚酸降低了1.4486、油酸降低了1.2698、亞油酸明顯下降了2.6799，而己醛含量增加了1.3414。醋制品與生品對(duì)比結(jié)果發(fā)現(xiàn)除了1-戊醇(降低了0.0083)、2-壬酮(降

4、低了0.0038)、6-十一酮(降低了0.0296)、2-十一酮(降低了0.0305)、2-丁基2-庚烯醛(降低了0.0521)等少量成分含量降低外基本都是大幅度增加，明顯的就是亞油酸增加了21.0523，有6倍之多。
　　 通過(guò)GC譜圖比較，發(fā)現(xiàn)天仙子及炮制品中脂肪酸成分相同，采用內(nèi)標(biāo)法對(duì)含量進(jìn)行計(jì)算發(fā)現(xiàn)生品與炮制品中脂肪酸化學(xué)成分含量無(wú)變化，利用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)天仙子脂肪酸進(jìn)行了成分分析，結(jié)果分得十一種脂肪酸占總脂肪酸的

5、99.2％，其中亞油酸含量高達(dá)到66.5％，其次是油酸為17.26％。
　　 采用HPLC法，通過(guò)對(duì)天仙子炮制前后氫溴酸東莨菪堿、硫酸阿托品、消旋山莨菪堿的含量進(jìn)行比較，結(jié)果表明清炒后可使天仙子中氫溴酸東莨菪堿、硫酸阿托品、消旋山莨菪堿的含量分別降低(mg·g-1)0.0187、0.0202、0.000602，而醋制后天仙子中氫溴酸東莨菪堿、硫酸阿托品、消旋山莨菪堿的含量分別增加(mg·g-1)0.0386、0.0446、0.0

6、00748。
　　 通過(guò)比較水煎煮與水浸提取多糖方法，水煎方法提取的多糖率比熱水浸泡的提取率低0.05％；由水浸法提取多糖的正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析得出，天仙子粗多糖提取的最佳工藝為A283C3D1，即8倍量的水、100℃、提取3次、每次2小時(shí)。
　　 采用紫外分光光度法，測(cè)定天仙子生品、清炒品、醋制品多糖的含量分別為21.93 mg·g-1、20.35 mg·g-1、20.51 mg·g-1，結(jié)果表明炮制前后對(duì)其多糖的影響不大

7、。
　　 2.天仙子生品及其炮制品藥理作用研究
　　 首先對(duì)天仙子生品及炮制品進(jìn)行了急性毒性實(shí)驗(yàn)，采用最大耐受量法，天仙子生品及其炮制品的水煎液給小鼠最大劑量一次性灌胃，均未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。小鼠口服天仙子生品與炮制品水煎液最大耐受量分別是200g·kg-1、190g·kg-1和192g·kg-1，分別相當(dāng)于臨床用量的8333、7917和8000倍。
　　 其次，通過(guò)小鼠熱板法、小鼠扭體法觀察其鎮(zhèn)痛作用，得出天仙子及

8、炮制品均具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用，且生品與兩種炮制品鎮(zhèn)痛效果無(wú)顯著性差異。
　　 二甲苯致小鼠耳廓腫脹法實(shí)驗(yàn)中，觀察其抗炎作用，結(jié)果表明陽(yáng)性對(duì)照組、天仙子生品組、天仙子炒品組、天仙子醋制品組對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹均具有顯著的抑制作用，說(shuō)明天仙子及炮制品具有抗炎作用。并且通過(guò)腫脹抑制率可以分析出天仙子醋制品抗炎作用強(qiáng)于炒制品強(qiáng)于生品。
　　 3.炮制工藝研究
　　 清炒法實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，天仙子中氫溴酸東莨菪堿、硫酸阿托品的

9、含量隨著清炒溫度的升高及清炒時(shí)間的延長(zhǎng)不段下降，可見(jiàn)溫度過(guò)高將破壞生物堿，使其減少。而醋制工藝在通過(guò)對(duì)干燥方法，加醋量，悶潤(rùn)時(shí)間，微波時(shí)間，微波強(qiáng)度的考察，確定因素水平，按正交試驗(yàn)表安排試驗(yàn)，以氫溴酸東莨菪堿、硫酸阿托品的含量為指標(biāo)，對(duì)醋天仙子的最佳炮制工藝進(jìn)行優(yōu)選，確定了最佳工藝為每100kg天仙子加40kg米醋，悶潤(rùn)2h，于微波低火，干燥4min。
　　 結(jié)論:
　　 化學(xué)成分研究方面，天仙子炮制前后對(duì)其揮發(fā)油、生物