抗骨質(zhì)增生口服液的半仿生模式研究.pdf

1、骨質(zhì)增生為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病名，也稱骨刺、骨贅，系中老年人的一種慢性疾病，其發(fā)病率與年齡的增長(zhǎng)成正比，臨床上又稱增生性關(guān)節(jié)炎、退行性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、老年性關(guān)節(jié)病等。隨著我國(guó)開始進(jìn)入老齡社會(huì)，骨質(zhì)增生的發(fā)病率有逐年上升趨勢(shì)，越來(lái)越受到醫(yī)藥專家的重視?？构琴|(zhì)增生口服液處方是我院多位老中醫(yī)歷經(jīng)多年的臨床實(shí)踐總結(jié)出來(lái)的經(jīng)驗(yàn)方，由淫羊藿、骨碎補(bǔ)、赤芍、熟地黃、甘草、紅花、狗脊、雞血藤、桃仁、萊菔子、鹿銜草、肉蓯蓉十二味藥組成，本品具有通經(jīng)活絡(luò)，舒筋止

2、痛，補(bǔ)腎強(qiáng)筋，除風(fēng)利濕之功效，臨床用于骨質(zhì)增生，瘀血腫痛，跌打損傷諸癥。大量的臨床觀察證明其抗骨質(zhì)增生療效確切。我院制劑室已將其制成丸劑用于臨床，但丸劑服用量大且以前的提取制備工藝欠合理。為盡可能多地保留有效成分、提高療效，同時(shí)減小服用量，方便用藥，本課題通過優(yōu)選提取和制備工藝將該方制備成口服液并進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，主要內(nèi)容如下：
　　 第一部分抗骨質(zhì)增生口服液的制備工藝研究
　　 目的：用均勻設(shè)計(jì)優(yōu)選抗骨質(zhì)增生口服液

3、半仿生提取法（簡(jiǎn)稱SBE法）的工藝條件，并在半成品中加入適當(dāng)輔料做成口服液。
　　 方法：采用均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)篩選制備工藝
　　 1.以第一煎水PH值、第二煎水PH值、第三煎水PH值和煎煮時(shí)間作為考察因素，以柚皮苷、甘草酸、淫羊藿苷、多糖和干膏得率為指標(biāo)來(lái)優(yōu)選工藝。
　　 2.加入適當(dāng)輔料做成口服液。
　　 結(jié)果：通過均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)篩選的最佳制備工藝
　　 1.第一煎水PH值6.00、第二煎水PH值6.

4、50、第三煎水PH值9.00和煎煮時(shí)間3.7h。
　　 2.提取液高速離心后，上清液加適量蜂蜜，矯味，加苯甲酸鈉3g，加水至1000ml，灌裝，滅菌，即得。
　　 結(jié)論：通過均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)確定了抗骨質(zhì)增生口服液的最佳提取工藝和最佳制備工藝，該工藝穩(wěn)定、可行、有效成分含量高。
　　 第二部分質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究
　　 目的：
　　 1.采用薄層色譜法，選擇適當(dāng)?shù)恼归_劑，建立抗骨質(zhì)增生口服液中熟地黃、赤芍、淫

5、羊藿和甘草的定性鑒別方法。
　　 2.采用高效液相色譜法，建立淫羊藿苷和柚皮苷的含量測(cè)定方法。
　　 方法：
　　 1.熟地黃的定性鑒別：使用硅膠G薄層板，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（8：1）為展開劑，在紫外燈（365nm）下檢視；赤芍的定性鑒別：使用硅膠G薄層板，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液（8：1：3：0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃烘約5分鐘。淫羊藿的定性鑒別：使用硅膠

6、GF254板。以甲醇-三氯甲烷.甲酸（1：4：0.2）為展開劑，置紫外光燈（254nm）下檢視。甘草的定性鑒別：使用1％NaOH溶液制備的硅膠G薄層板，以三氯甲烷-甲醇-水（6：2：0.3）為展開劑，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視。
　　 2.含量測(cè)定：
　　 （1）高效液相色譜法：參考相關(guān)文獻(xiàn)選擇合適的固定相，調(diào)整流動(dòng)相的組成、配比、流速以及柱溫，在最大吸收波長(zhǎng)下測(cè)定，

7、使指標(biāo)峰分離完全、理論塔板數(shù)符合要求；紫外分光光度法：選擇合適的顯色方法和測(cè)定波長(zhǎng)。
　　 （2）線性范圍考察以色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)（紫外分光光度法以吸收度為縱坐標(biāo)，以測(cè)定液濃度為橫坐標(biāo)），進(jìn)行線性回歸，得回歸曲線并考察線性范圍。
　　 （3）方法學(xué)考察：分別考察測(cè)定方法的精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和加樣回收率。
　　 （4）樣品含量測(cè)定：取3批抗骨質(zhì)增生口服液分別制備供試品溶液，進(jìn)樣，測(cè)定指標(biāo)成

8、分的含量。
　　 結(jié)果：
　　 1.熟地黃、淫羊藿、赤芍和甘草的TCL圖譜清晰，樣品溶液在與對(duì)照藥材溶液相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照溶液顯示無(wú)干擾。
　　 2.柚皮苷的色譜條件為：Diamonsil（250m×4.6mm，5μm）色譜柱，流動(dòng)相：甲醇-5％冰醋酸（33：67），流速1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)283nm?；貧w曲線為v=1625.1x-9.6231，r=0.9997，柚皮

9、苷在0.0664ug～1.0624ug范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。該方法精密度、重現(xiàn)性和在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定穩(wěn)定性的RSD分別為0.76％、0.43％和2.090/0，平均加樣回收率為100.12％，RSD為O.64％。
　　 3.淫羊藿苷的色譜條件為：Diamonsil（250m×4.6mm，5um）色譜柱，流動(dòng)相：乙膊水（27：73），流速1.0ml/min，柱溫：25℃，檢測(cè)波長(zhǎng)270nm。回歸曲線為y=1617.4x+53.123，