基因敲除腺苷A2A受體對慢性低O2高CO2模型小鼠海馬細胞凋亡的影響.pdf

1、目的:研究基因敲除腺苷A2A受體對慢性低O2高CO2模型小鼠海馬細胞凋亡的影響及可能的機制。
　　方法:16只野生型和16只敲除型雄性小鼠分別隨機分為低O2高CO24周野生組(4HH+/+);對照野生組(NC+/+)和低O2高CO24周敲除組（4HH-/-）:對照敲除組(NC-/-)，每組8只。將4HH組小鼠置于常壓低O2高CO2艙內，通過N2調節(jié)艙內O2濃度使其降低并維持在9％-11％，通過CO2調節(jié)使其濃度維持在5.5％-6.

2、5％，每天8h，每周6d。其余時間與NC組在同一室內飼養(yǎng)，持續(xù)4周。原位末端標記(TUNEL)法檢測海馬細胞凋亡指數(AI)，caspase-3活性檢測試劑盒測定海馬caspase-3活性，實時定量PCR檢測海馬Bcl-2mRNA，BaxmRNA表達量，蛋白免疫印跡(Western Blot)檢測海馬磷酸化p38蛋白的表達。
　　結果:(1)AI:
　　與所對應的NC組相比4HH小鼠海馬的AI明顯升高(P＜0.05);與4H

3、H-/-組相比，4HH+/+組升高更明顯(P＜0.05);
　　(2) Caspase-3活性:
　　與所對應的NC組相比4HH小鼠海馬的Caspase-3活性明顯升高(P＜0.05);與4HH-/-組相比，4HH+/+組升高更明顯(P＜0.05);
　　(3) Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表達:
　　與所對應的NC組相比4HH小鼠海馬Bcl-2 mRNA表達明顯下調（P＜0.01）而Bax mRNA表

4、達明顯上調（P＜0.01），與4HH-/-組相比4HH+/+組的Bcl-2 mRNA表達下調更明顯而Bax mRNA表達上調更明顯(P＜0.01);
　　(4) Western blot檢測結果顯示:與所對應的NC組相比4HH小鼠海馬磷酸化p38蛋白表達量均明顯上調(P＜0.01)，與4HH-/-組相比4HH+/+組上調更明顯(P＜0.01);
　　(5)上述各指標在兩對照組即（NC+/+）與(NC-/-)之間均沒有明顯差別

5、(P＞0.05)。
　　結論:(1)慢性低O2高CO2模型小鼠較對照組海馬細胞凋亡數增加;Bcl-2 mRNA表達明顯下調而Bax mRNA表達明顯上調;磷酸化p38蛋白表達量明顯上調;
　　(2)基因敲除腺苷A2A受體可能通過抑制p38MAPK信號轉導通路的活化，抑制BaxmRNA基因表達和促進Bcl-2mRNA基因表達而減少慢性低O2高CO2模型小鼠海馬細胞凋亡;
　　(3)基因敲除腺苷A2A受體對對照組小鼠海馬細