干細(xì)胞序貫移植中脫敏療法誘導(dǎo)第三方免疫耐受的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:探討建立小鼠異基因造血干細(xì)胞移植模型后,神經(jīng)干細(xì)胞經(jīng)脫敏步驟,再次移植神經(jīng)干細(xì)胞入小鼠體內(nèi)免疫耐受及安全性進(jìn)行初步探索。
  方法:第一部分:異基因移植模型的建立,在致死性全身照射(total body irradiation,TBI)8.0Gy預(yù)處理方案下,6-8周齡 BALB/C小鼠首先被隨機(jī)分成3組(n=10只/組):A組空白對(duì)照組小鼠僅行放射線治療;B組小鼠照射后給予胎鼠及新生鼠外周血(fetaland neonat

2、al murine peripheral blood,FNPB)治療;C組小鼠照射后給予骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)治療;比較造血干細(xì)胞移植模型生存率。第二部分:異基因移植模型脫敏處理,Ⅰ組小鼠照射后給予造血干細(xì)胞移植(hematopoietic stem celltransplantation,HSCT),神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell,NSC)脫敏和腦實(shí)質(zhì)注射NSC;Ⅱ組小

3、鼠照射后給予 HSCT,口服環(huán)孢素 A(Cyclosporin A,CsA),腦實(shí)質(zhì)注射 NSC;Ⅲ組小鼠照射后給予 HSCT治療,21天后腦實(shí)質(zhì)注射 NSC。分析各組小鼠存活期、死亡率、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、體重、臨床表現(xiàn),并采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組小鼠嵌合水平,對(duì)小鼠大腦組織行冰凍切片,免疫組化染色并采用體視學(xué)系統(tǒng)計(jì)數(shù)神經(jīng)干細(xì)胞移植的存活情況。
  結(jié)果:每只C57BL/6孕鼠平均采集到MNC數(shù)為(2.5±0.4)×106,每只C

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