椪柑皮中橙皮苷的提取與純化.pdf

1、柑橘屬中的類黃酮含量豐富，易于分離，具有顯著的藥理學(xué)作用。橙皮苷是柑橘屬中含量豐富的一種類黃酮，因其對(duì)血管的保護(hù)作用被廣泛用作心血管良藥，其在食品、化妝品、化工等方面的廣泛作用更增加了人們對(duì)橙皮苷研究的興趣。橙皮苷大量存在于廢棄的柑橘果皮中，目前還沒(méi)有得到充分利用。本文系統(tǒng)研究了衢州椪柑皮中橙皮苷的提取與純化方法?，F(xiàn)將主要研究結(jié)果報(bào)告如下： 1、用自制含NaOH溶液的硅膠板，采用乙酸乙酯∶甲醇∶水=10∶3∶2的展開劑，283n

2、m紫外燈下可清楚的看到橙皮苷斑點(diǎn)呈黃綠色，斑點(diǎn)清晰圓潤(rùn)。橙皮苷與雜質(zhì)得到較好分離。 2、利用硝酸鋁體系與橙皮苷形成絡(luò)合物的原理，采用分光光度法測(cè)定橙皮苷含量，簡(jiǎn)單快速。條件一致時(shí)，可比性較強(qiáng)，為探索最佳提取工藝和中間指標(biāo)控制提供了簡(jiǎn)單有效的評(píng)價(jià)方法。 3、運(yùn)用反相液相色譜法測(cè)定橙皮苷，重復(fù)性、穩(wěn)定性都較好，色譜柱選用DikmaC18柱(4.6×250mm5μm)，流動(dòng)相∶甲醇∶無(wú)水醋酸∶水=180∶18∶250；檢測(cè)波長(zhǎng)

3、：283nm，流速：1.0ml/min，進(jìn)樣量：自動(dòng)進(jìn)樣，柱溫：室溫27℃。 4、對(duì)橙皮苷的甲醇提取條件進(jìn)行了系統(tǒng)研究，通過(guò)正交和驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)確定了提取最佳條件，即1g：80ml分析純甲醇，于80℃下索氏提取4小時(shí)。反復(fù)三次提取，確定提取液中無(wú)橙皮苷剩余(紫外檢測(cè)283nm下無(wú)吸收)。在此條件下，對(duì)采自10月30日，11月17日和12月1日的三批椪柑皮分別粉碎至40目(0.45mm)，10目(2mm)，2-4mm，研究不同采摘時(shí)間

4、和粉碎大小對(duì)提取量的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)采摘時(shí)間對(duì)提取有顯著影響，隨著時(shí)間的后推，提取量顯著減少。粉碎大小40目與10目之間沒(méi)有顯著差異，而40目與2-4mm有顯著差異。可見為提高提取量，提取粒度以小于2mm為宜。 因此，10月30日采摘并粉碎到2mm的椪柑皮可以提取最大量的橙皮苷，取1g皮用最佳工藝進(jìn)行提取，可得64.04mg橙皮苷(HPLC測(cè)定)，即此皮中橙皮苷含量為6.4％。并假設(shè)該皮中所含全部橙皮苷為64.04mg，提取率以此

5、為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算。 5、椪柑皮的乙醇提取方法更有利于椪柑皮資源的綜合利用。本文研究了乙醇和甲醇的提取率差異，并對(duì)乙醇提取的最優(yōu)條件進(jìn)行了研究。乙醇提取的最佳工藝是：80℃時(shí)，索氏提取6h，料液比為1g椪柑皮：25ml無(wú)水乙醇。提取率為78％，得率5％。 6、建立了堿提酸沉提純橙皮苷的方法，取1g粗橙皮苷，加入水，用攪拌機(jī)攪拌45min，中途不斷加入飽和石灰水，調(diào)節(jié)pH至11.5。離心后取溶液加1％鹽酸溶液，調(diào)節(jié)pH至3，65℃

6、加熱幫助結(jié)晶，放置過(guò)夜獲得純品，最高純度可達(dá)97.46％(HPLC)。 7、在前人的研究基礎(chǔ)上，采用HSCCC對(duì)橙皮苷粗品進(jìn)行制備性分離，120min內(nèi)獲得橙皮苷純品，達(dá)到定量對(duì)照品要求，制備橙皮苷對(duì)照品提供了一種簡(jiǎn)捷實(shí)用的新途徑。HSCCC提純條件：氯仿∶甲醇∶水(4∶3∶2)，儀器反轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速800rpm，進(jìn)樣量為0.8mg(用甲醇超聲溶解)，流速選擇2.0ml/min。純度可達(dá)98％。 研究表明，椪柑皮中的橙皮苷可用