絞股藍皂甙對人翼狀胬肉成纖維細胞增殖的影響.pdf

1、目的：翼狀胬肉是一種常見的、多發(fā)的眼表疾病，復(fù)發(fā)率較高。絞股藍皂甙(gypenosides,Gyp)為葫蘆科植物絞股藍的主要藥效成分。國內(nèi)外多年的藥理研究表明，Gyp具有抗腫瘤,降血脂、血糖，抗氧化，抗肝、腎纖維化等作用。這些作用使其具備了輔助治療和預(yù)防翼狀胬肉的潛力。但確切機制尚未明了，本研究旨在初步探討絞股藍皂甙對人翼狀胬肉成纖維細胞(human pterygium fibroblasts,HPF)增殖的影響。
　　 方法：

2、取術(shù)中切下的人翼狀胬肉組織標本，體外貼壁細胞培養(yǎng)，傳至第3-6代時，以抗波形蛋白抗體進行免疫組化染色，結(jié)合細胞形態(tài)學特征鑒定為成纖維細胞；分別用25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml濃度的Gyp干預(yù)HPF，同時設(shè)不加藥的陰性對照組及只加培養(yǎng)液的空白對照組,24,48,72，96小時后，MTT法檢測細胞增生抑制率，并繪出時間、劑量效應(yīng)曲線；用6孔板做細胞爬片后，分別用0μg/ml、25μg/m

3、l、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml濃度的Gyp作用24小時，免疫組化法檢測HPF的增殖細胞核抗原（PCNA）的表達。
　　 結(jié)果：（1）體外培養(yǎng)的HPF免疫組化染色后，波形蛋白表達陽性，結(jié)合細胞形態(tài)學特征，可以鑒定為成纖維細胞。（2）MTT實驗結(jié)果顯示，Gyp濃度≥25μg/ml時，能顯著抑制HPF增生（p<0.05）。隨著Gyp干預(yù)濃度的增大和干預(yù)時間的延長，即在25-400μg/ml濃度