P物質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有?！?。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。 j 一| ．，．：、+ 、’j i 二：j 、，河北醫(yī)科大學(xué)研究生

2、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：闡廁車 導(dǎo)師簽章：拋y 年3 月噦?cè)找籣摹。／，。，t 冀0 ≯夢(mèng)0曠。鬃奠囂。一 。簿務(wù)～ ：．：j ：碳相、，，．J ．．。＼＼月 氧弓蓋年 導(dǎo)懌雨蘭<島南司，’步懶砂學(xué) 級(jí) 二中文摘要P 物質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞

3、生物學(xué)特性的影響摘 要隨著社會(huì)的發(fā)展，由各種原因?qū)е碌难例X意外露髓逐漸增多，傳統(tǒng)蓋髓方法效果往往不理想，近年來，越來越多的學(xué)者把牙髓生物學(xué)研究的重點(diǎn)放到了牙髓細(xì)胞上，從細(xì)胞水平為臨床研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。目的：采用組織塊酶解法培養(yǎng)具有干細(xì)胞特性的人牙髓細(xì)胞，通過觀察P 物質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞的增殖、分化及超微結(jié)構(gòu)的影響，探討P物質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及其作用機(jī)制，為臨床開展活髓保存治療提供一條新的思路。方法：1 人牙髓細(xì)胞

4、的原代培養(yǎng)及組織來源鑒定選取因阻生或正畸需要而拔除的健康、完整、無齲、無隱裂恒牙，清理牙齒表面后于無菌條件下取出牙髓組織，采用組織塊酶解法進(jìn)行原代培養(yǎng)，首次傳代選擇原位傳代，以后待細(xì)胞長(zhǎng)滿孔底8 0 ％后按常規(guī)傳代方法進(jìn)行傳代。取第3 代對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用S A B C 法進(jìn)行波形蛋白、角蛋白免疫組化染色，光鏡下觀察；用H E 對(duì)蓋玻片上的細(xì)胞進(jìn)行染色，光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。2 人牙髓細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的檢測(cè)取第3 代人牙髓細(xì)胞，制成單細(xì)胞懸液，

5、以2 x 1 0 4 個(gè)／孔的密度接種于2 4 孔板，自接種后第二天開始每天隨機(jī)消化5 孔進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，取平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)8 天，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。3P 物質(zhì)對(duì)H D P C s 增殖活性的影響選取第4 代人牙髓細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，以2 x 1 0 4 個(gè)／1 m 的密度接種于9 6 孔培養(yǎng)板，每孑L 2 0 0 微升。2 4 4 , 時(shí)后，棄去原培養(yǎng)液，隨機(jī)分為5 個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1 個(gè)對(duì)照組，另設(shè)一空白對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組分別加入用含1 ％F