長穗桑化學(xué)成分和生物活性研究.pdf

1、長穗桑為?？粕僦参铮置跎?、黃蠶桑、花桑，是重要農(nóng)作物栽培桑的野生近緣種，產(chǎn)于我國南部地區(qū)。其根、枝、葉、果實(shí)均可作藥用。對(duì)長穗桑莖皮95％乙醇提取物和水提取物分別進(jìn)行抗氧化和降糖活性篩選，結(jié)果表明，95％乙醇提取物的乙酸乙酯部位有顯著的抗氧化活性；95％乙醇提取物的丙酮、甲醇部位以及水提取物有明顯的降糖活性。 本論文運(yùn)用多種色譜技術(shù)和波譜技術(shù)，并結(jié)合化學(xué)方法，對(duì)長穗桑莖皮的乙醇提取物和水提取物分別進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究

2、，并對(duì)其中的單體化合物進(jìn)行了生物活性篩選。長穗桑莖皮采自廣西壯族自治區(qū)金秀縣，由廣西中醫(yī)學(xué)院劉壽養(yǎng)教授鑒定。 從長穗桑莖皮中共分離鑒定了74個(gè)化合物，包括乙醇提取物中得到63個(gè)，以及水提取物中得到11個(gè)。其中31個(gè)化合物(1—31)為新化合物，其余均為首次從該植物中分離得到。從乙醇提取物中分離并鑒定的63個(gè)化合物中，包括24個(gè)Diels—Alder型加合物，30個(gè)2—苯基苯并呋喃類衍生物，6個(gè)黃酮類化合物，3個(gè)二苯乙烯類化合物，

3、分別為：wittiorumin A(1)，wittiorumin B(2)，wittiorumin C(3)，wittiorumin D(4)，wittiorumin E(5)，wittioruminF(6)，wittiorumin G(7)，wittifuran A(8)，wittifuran B(9)，wittifuran C(10)，wittifuran D(11)，wittifuranE(12)，wittifuran F(13)

4、，wittifuran G(14)，wittifuranH(15)，wittifuran I(16)，wittifuran J(17)，wittifuran K(18)，wittifuran L(19)，wittifuran M(20)，wittifuran N(21)，wittifuran O(22)，wittifuranP(23)，wittifuran Q(24)，wittifuranR(25)，wittifuranS(26)，wi

5、ttifuranT(27)，wittifuranU(28)，wittifuran V(29)，wittifuran W(30)，wittifuran X(31)，chalcomoracin(32)，mongolicin F(33)，mulberrofuran J(34)，mulberrofuran K(35)，mulberrofuran G(36)，guangsangon L(37)，kuwanon J(38)，kuwanon X(39

6、)，guangsangon G(40)，guangsangon B(41)，guangsangon D(42)，kuwanon P(43)，albafuranC(44)，sorocein A(45)，mulberrofuranE(46)，mulberrofuran F(47)，mulberrofuran O(48)，moracin M(49)，moracin C(50)，2—(3，5—dihydroxyphenyl)—5，6—dihyd

7、roxybenzofuran(51)，moracin P(52)，mulberroside C(53)，austrafuran C(54)，quercetin(55)，5，7，3'，4'-Tetrahydroxy—3—metho—xyflavone(56)，norartocarpanone(57)，dihydrokaempferol(58)，euchrenone a7(59)，morachalcone A(60)，resveratrol

8、(61)，oxyresveratrol(62)，4'-Prenyloxyresveratrol(63)。 從長穗桑莖皮水提取物中分離并鑒定的11個(gè)化合物中，包括7個(gè)多羥基生物堿類化合物，2個(gè)酰胺類化合物，1個(gè)氨基酸，以及甜菜堿，分別為：1—deoxynojirimycin(64)，fagomine(65)，3—epi—fagomine(66)，1，4—dideoxy—1，4—imino—D—arabinitol(67)，2—O-

9、α—D—galactopyranosyl—1—deoxynojirimycin(68)，4—O-β—D—glucopyranosyl—fagomine(69)，1，4—dideoxy—1，4—imino—(2—O-β—D—glucopyranosyl)—D—arabinitol(70)，(2S)—citrullina—mide(71)，grateloupinamide(72)，asparagic acid(73)，betaine(74)

10、。 另外，結(jié)合降糖活性篩選，分別對(duì)95％乙醇提取物的丙酮、甲醇部位進(jìn)行分離后發(fā)現(xiàn)，具有抑制α—葡萄糖苷酶活性部分的物質(zhì)基礎(chǔ)均為多羥基生物堿類化合物。 通過對(duì)長穗桑莖皮乙醇提取物中分離到的15個(gè)2—苯基苯并呋喃類化合物(化合物8—11，13—14，17—18，21—27)的正離子ESI—MS/MSn質(zhì)譜進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，化合物中含有異戊烯基，()牛兒基等取代基，一般發(fā)生芐基裂解。此外，這些取代基往往與鄰位羥基環(huán)合形成六元氧環(huán)

11、，此類化合物的ESI—MS/MSn質(zhì)譜裂解因六元氧環(huán)部分的差異而有所不同。而且，不同結(jié)構(gòu)類型的2—苯基苯并呋喃類化合物裂解后產(chǎn)生特征離子，可用于此類化合物的快速檢測(cè)以及在線鑒定。 長穗桑莖皮乙醇提取物乙酸乙酯部分中分離到的29個(gè)化合物(化合物1—3，8，10，12—14，16—17，21—23，25—26，33—36，39—41，43，45，47，49—51，56)，濃度為10-5 M時(shí)，對(duì)Fe2+—半胱氨酸誘導(dǎo)的肝微粒體脂質(zhì)過

12、氧化有抑制活性(抑制率>50％)。在抑制PAF刺激的多形核白細(xì)胞β—葡萄糖苷酸酶釋放的模型上，11個(gè)化合物(化合物10-11，16，32，34，49—51，54，60，62)具有抗炎活性(抑制率大于50％，P<0.05)。 采用MTT法測(cè)定了長穗桑莖皮中分離得到的56個(gè)化合物對(duì)五種人腫瘤細(xì)胞(A549：人肺腺癌細(xì)胞；Bel—7402：人肝癌細(xì)胞；BGC—823：大胃癌細(xì)胞；HCT—8：人結(jié)腸癌細(xì)胞；A2780：人卵巢癌細(xì)胞)的抑

13、制作用。結(jié)果顯示26個(gè)化合物(化合物8，10-11，13—14，16，21—26，29，32—36，39，47，50-52,56，61，62)，對(duì)入癌細(xì)胞有抑制作用；水提取物中得到的單體化合物(化合物64—73)均無抗腫瘤活性(超過10μg/mL，認(rèn)為無活性)。 對(duì)長穗桑莖皮水提取物中得到的10個(gè)化合物進(jìn)行α—葡萄糖苷酶抑制活性(蔗糖底物)篩選，測(cè)試結(jié)果顯示7個(gè)多羥基生物堿(化合物64—70)以及1個(gè)酰胺類化合物(化合物72)有