基于時藏理論的“腎主骨”與細胞信號轉(zhuǎn)導相關(guān)性研究.pdf

1、時藏理論是中醫(yī)理論體系的核心內(nèi)容，它體現(xiàn)了中醫(yī)學固有的思維模式，從時藏理論入手研究“腎主骨”，以至于對藏象的實質(zhì)進行研究都具有至關(guān)重要的意義。當前，在中醫(yī)理論的指導下，充分運用傳統(tǒng)方法和現(xiàn)代科學技術(shù)(包括現(xiàn)代醫(yī)學技術(shù))去尋找中醫(yī)學對人體認識的規(guī)律，用現(xiàn)代語言闡述中醫(yī)學的科學內(nèi)涵，為中醫(yī)學的發(fā)展服務(wù)，是中醫(yī)理論基礎(chǔ)研究在相當一段時間內(nèi)的主要目標。 1．目的：本課題擬從時藏理論的整體調(diào)控思想出發(fā)把中醫(yī)理論體系的傳統(tǒng)思維模式融入實驗設(shè)

2、計和研究之中，以“腎主骨”生理功能的研究為切入點，對中醫(yī)藏象既基于實質(zhì)器官又高于實質(zhì)器官，以“時”測“藏”的內(nèi)涵進行探討。通過把整體信息轉(zhuǎn)導觀念和松果腺與下屬靶腺及細胞信使相結(jié)合的研究方法，揭示“腎主骨”的實質(zhì)，并為中醫(yī)藏象學說的研究和臨床病證病理的深化及防治提供新的方向和靶點。 2．方法： 2.1理論研究：通過運用方法論的三個層次，即哲學層次、一般方法論層次及具體方法論的層層遞進的分析方法，對中醫(yī)“腎主骨”的中醫(yī)理論內(nèi)

3、涵和現(xiàn)代研究的實證進行闡釋和分析。 2.2 臨床研究： 2.2.1設(shè)計思路： 中醫(yī)學臟腑的概念是解剖學、生理學及病理學的綜合涵義，尤其是系統(tǒng)功能的單位。中醫(yī)。腎對骨的作用，既有廣義之腎一甲狀腺軸的調(diào)節(jié)作用，又離不開解剖學狹義腎的參與。 2.2.2．一般資料以慢性腎功能衰竭尿毒癥的病人為觀察對象，按照診斷標準，納入標準及排除標準，選擇2006年中國中醫(yī)研究院西苑醫(yī)院維持性血透患者共39例。 2.2.

4、3調(diào)查指標： 一般項目包括姓名、性別、年齡、患病時間、開始血透時間、中醫(yī)診斷、西醫(yī)診斷、本次血透時間等。調(diào)查項目包括腎功能指標、生化指標、血常規(guī)等。調(diào)查的各項臨床檢驗指標的時間以在夏至和冬至前后7天之內(nèi)的為準。 2.2.4 統(tǒng)計方法： 運用SPSS12.0分析軟件進行T檢驗和單因素方差分析。 2.3 實驗研究： 2.3.1 設(shè)計思路： 本研究以“腎主骨，以應(yīng)冬氣”相關(guān)的甲狀腺軸和對光敏感的高位節(jié)律調(diào)節(jié)器松

5、果腺為切入點，選擇了完成跨膜信號轉(zhuǎn)換的重要信使cAMP、cGMP和IP<,3>為研究對象，來觀察生理狀態(tài)下的甲狀腺組織的形態(tài)學季節(jié)性改變的特點，以及季節(jié)性變化對骨代謝的影響。 2.3.2實驗動物： SD大鼠，雄性，180—200 g/只。隨機分成生理組，手術(shù)組(結(jié)扎矢靜脈并摘除松果腺組)，偽手術(shù)組(結(jié)扎矢靜脈但不摘除松果腺組)。 2.3.3 檢測方法： IP<,3>含量測定，運用放射免疫法；cAMP、cG

6、MP含量測定，運用酶聯(lián)免疫法；甲狀腺組織形態(tài)學，運用光鏡觀察；BGP含量測定，運用放射免疫法；BALP及CICP含量測定，運用酶聯(lián)免疫法。 2.3.4統(tǒng)計方法： 分析數(shù)據(jù)運用SPSS12.0分析軟件進行T檢驗或單因素方差分析。 3．結(jié)果 3.1 理論研究結(jié)果 3.1.1 中醫(yī)時藏理論是整體觀這一思維模式所決定的，這種思維模式?jīng)Q定了中醫(yī)學認識人體生命活動的角度注重整體性、統(tǒng)一性和聯(lián)系性，這種古樸的方

7、法論與現(xiàn)代醫(yī)學新的醫(yī)學模式不謀而合，即“生理-心理-社會-環(huán)境”的模式。 3.1.2 中醫(yī)時藏理論中的兩個主要要素“時”與“藏”具有辯證的關(guān)系，“一切存在的基本形式是空間和時間?！?(恩格斯語)?！皶r”作用于“藏”而影響其功能活動，“藏”既是接受“時”的各種信息的靶點，同時又具有時空的某些特征，時藏理論是中醫(yī)學理論體系的核心。 3.1.3 從中醫(yī)時藏理論認識中醫(yī)腎整體調(diào)控順時適應(yīng)性調(diào)節(jié)的內(nèi)在機制，應(yīng)用系統(tǒng)論的觀點得以全面

8、詮釋。整體性原則、有序性原則、互相聯(lián)系性原則與動態(tài)性原則也正是中醫(yī)腎整體調(diào)控系統(tǒng)的特點所在。 3.1.4從“腎主骨”理論現(xiàn)代研究的內(nèi)涵中發(fā)現(xiàn)：腎與骨在胚胎發(fā)生學的同源性和分子生物學水平的相關(guān)性表明二者是密切相關(guān)的，解剖學狹義的腎與甲狀腺軸功能的廣義的腎對骨代謝的作用，以及腎對骨順時適應(yīng)性的調(diào)節(jié)實證了“腎”系統(tǒng)功能性單元的內(nèi)涵。 3.1.5 基于時藏理論的“腎主骨”與細胞信號轉(zhuǎn)導的相關(guān)性工作假說：“腎主骨"是中醫(yī)腎整體調(diào)控

9、順時適應(yīng)性調(diào)節(jié)作用的具體體現(xiàn)形式，以冬季光照時間短這一外界刺激因素作為激發(fā)源，激活第二信使來傳遞外界的信息，引發(fā)體內(nèi)器官形態(tài)及功能的變化，進而產(chǎn)生與冬季相應(yīng)的生理效應(yīng)。 3.2 臨床研究結(jié)果 3.2.1 冬夏季節(jié)對腎性骨病腎功能的影響CREA與BUN明顯高于正常值，呈現(xiàn)冬高夏低的季節(jié)性變化趨勢。BUN冬夏季節(jié)比較有顯著性差異，P<0.05。 3.2.2 冬夏季節(jié)對腎l生骨病甲狀旁腺激素的影響PTH冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計

10、學上無差異，數(shù)值呈現(xiàn)冬高夏低季節(jié)性變化趨勢。 3.2.3 冬夏季節(jié)對腎性骨病血常規(guī)的影響WBC、RBC、HB無冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計學上無差異，但HB與正常值比較呈現(xiàn)明顯下降的趨勢。 3.3.4 冬夏季節(jié)對腎性骨病生化指標的影響除了CL冬夏季節(jié)比較有顯著性差異，P<0.05外，其它指標冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計學上無差異，但血P含量呈現(xiàn)高于正常值的變化趨勢。 3.3實驗研究結(jié)果 3.3.1 冬夏季節(jié)對機體IP<,3>細胞

11、信號轉(zhuǎn)導物質(zhì)的影響正常對照組：下丘腦IP<,3>含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.05；甲狀腺IP<,3>含量呈現(xiàn)冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術(shù)組：下丘腦與甲狀腺正常冬夏季節(jié)差異消失。 3.3.2 冬夏季節(jié)對機體cAMP、cGMP細胞信號轉(zhuǎn)導物質(zhì)的影響cAMP：正常對照組：下丘腦cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 垂體cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0

12、.05，偽手術(shù)組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 甲狀腺cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術(shù)組：下丘腦、垂體正常冬夏季節(jié)差異消失。甲狀腺冬夏手術(shù)組之間有顯著性差異，P<0.01cGMP：正常對照組：下丘腦cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 垂體cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<

13、0.05。 甲狀腺cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術(shù)組：下丘腦冬夏手術(shù)組之間有顯著性差異，P<0.01；垂體冬夏手術(shù)組之間有顯著性差異，P<0.05；甲狀腺正常冬夏季節(jié)差異消失。 cAMP/cGMP：正常對照組：下丘腦、垂體及甲狀腺cAMP與cGMP含量相比較均有cAMP高cGMP低的變化，cAMP/cGMP下丘腦、垂體及甲狀腺均無顯著性差

14、異，P>0.05，但甲狀腺的cAMP/cGMP同樣呈現(xiàn)冬低夏高的變化趨勢。 摘除松果腺手術(shù)組：手術(shù)組垂體cAMP/cGMP數(shù)值顯示冬夏季節(jié)性消失。 3.3.3 冬夏季節(jié)對機體血清骨代謝的影響生理組CICP含量呈現(xiàn)冬高夏低的變化趨勢：BALP含量呈現(xiàn)冬高夏低，P<0.01；BGP含量冬夏之間無差異，P>0.05；CICP、BALP及BGP手術(shù)組冬夏季節(jié)性消失。四時模擬冬至組與夏至比較無差異，P>0.05，但CICP、BAL

15、P呈現(xiàn)冬高夏低變化趨勢。 3.3.4 冬夏季節(jié)對機體甲狀腺組織的影響冬夏季節(jié)對正常對照組甲狀腺組織的影響有差異，對摘除松果腺手術(shù)組影響不大。 3.3.5 基于時藏理論的“腎主骨”工作機制大體模型： 冬季光照時間的縮短，經(jīng)過視網(wǎng)膜一下丘腦視交叉上核一松果腺途徑，促使松果腺分泌較多的褪黑素。MT通過位于細胞膜上高親和性G蛋白偶聯(lián)受體直接作用于甲狀腺軸，啟動細胞內(nèi)第二信使系統(tǒng)。通過抑制cAMP的生理反應(yīng)，調(diào)節(jié)IP<,3

16、>的代謝活動而調(diào)整細胞的生理效應(yīng)，甲狀腺組織的形態(tài)學改變以使甲狀腺激素分泌增加，進而引起骨代謝指標BALP、CICP水平的增加以加強成骨細胞代謝，同時T<,3>還可以調(diào)節(jié)破骨細胞的活性，最終結(jié)果使骨代謝活性的增強表明骨貯藏物質(zhì)與能量以應(yīng)冬氣，并為春生、夏長做準備。 4．結(jié)論 本研究從細胞信號轉(zhuǎn)導的角度探討冬夏季節(jié)甲狀腺軸對骨代謝的調(diào)節(jié)作用，結(jié)果表明：下丘腦、垂體、甲狀腺由于冬夏季節(jié)的變化表現(xiàn)有第二信使的季節(jié)性變化特點，并