桃樹類病毒鑒定及序列多樣性分析.pdf

1、桃樹在我國(guó)大部分地區(qū)廣泛栽培,據(jù)統(tǒng)計(jì)截至2006年,我國(guó)桃種植面積達(dá)677萬(wàn)公頃.但是,近年來(lái)隨著桃樹產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,桃樹類病毒的侵染日益增強(qiáng),導(dǎo)致斑呆、葉片上出現(xiàn)斑點(diǎn)或黃化等,嚴(yán)重影響果品的經(jīng)濟(jì)價(jià)值及果樹業(yè)的正常發(fā)展.目前國(guó)外報(bào)道侵染桃樹的類病毒有兩種:啤酒花矮化類病毒 (Hop stuntviroid,HSVd) 和桃潛隱花葉類病毒 (Peach latent mosaic viroid,PLMVd).PLMVd在我國(guó)桃樹上有報(bào)道,HS

2、Vd的發(fā)生情況則沒(méi)有報(bào)道. 桃樹起源于我國(guó),調(diào)查和了解這兩種類病毒在我國(guó)發(fā)生分布情況以及我國(guó)HSVd桃樹分離株的序列變異情況對(duì)于類病毒病害檢測(cè)和防治以及進(jìn)一步研究類病毒起源、致病性等具有重要意義. 本文對(duì)采自中國(guó)北京50個(gè)桃葉樣品(L1-L50)和6個(gè)桃果實(shí)樣品(F1-F6),河北、山東、陜西、廣西、北京、新疆、福建、甘肅等地41個(gè)不同桃枝條樣品(B1-B41)共97個(gè)樣品進(jìn)行RNA抽提.經(jīng)斑點(diǎn)雜交、RT-PCR以及生物

3、學(xué)鑒定檢測(cè),來(lái)自北京、陜西、新疆、福建以及甘肅的18個(gè)樣品檢測(cè)到HSVd,總檢出率達(dá)18.6﹪.三種方法均可用于檢測(cè)桃樹上的HSVd,具有一致性.經(jīng)斑點(diǎn)雜交檢測(cè),88個(gè)桃樣品呈現(xiàn)PLMVd陽(yáng)性,總檢出率高達(dá)90.7﹪,除了福建的樣品未檢測(cè)到之外,北京、陜西、新疆、河北、山東、廣西、甘肅的樣品都檢測(cè)到了PLMVd,而且發(fā)生率都很高. 從地理分布上看,采自我國(guó)北京、陜西、新疆以及甘肅的17個(gè)桃樣品受到HSVd和PLMVd的混合侵染,

4、而福建的桃樣品則僅檢測(cè)到HSVd,河北、廣西以及山東桃樣品僅檢測(cè)到PLMVd. 18個(gè)HSVd陽(yáng)性樣品中選取9個(gè)樣品(L19,L42,L48,B6,B18,F1,F4,F5,F6)進(jìn)行HSVd克隆測(cè)序,得到22條不同HSVd核酸序列,所得序列與GenBank中已報(bào)道的HSVd序列同源性達(dá)93﹪～100﹪,可以看出,國(guó)內(nèi)桃樹HSVd分離物核酸序列變異比較小,地域和品種間核酸序列無(wú)明顯差異. 本研究完成了22條HSVd核酸序