廣棗總黃酮針對(duì)病毒性心肌炎的體外藥效學(xué)研究.pdf

1、目的通過建立體外病毒性心肌炎(VMC)細(xì)胞模型，研究廣棗總黃酮(TFCA)的體外抗柯薩奇B組3型病毒(CVB3)作用及其作用機(jī)制，探究其作用靶點(diǎn)，為TFCA進(jìn)一步開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。方法采用差速貼壁法培養(yǎng)原代乳鼠心肌細(xì)胞，鏡下觀察心肌細(xì)胞搏動(dòng)次數(shù)，使用α-actin免疫組化法鑒定培養(yǎng)心肌細(xì)胞的純度；在細(xì)胞水平測(cè)定陽(yáng)性藥鹽酸胍以及廣棗總黃酮的藥物毒性；以CVB3感染心肌細(xì)胞建立病毒性心肌炎細(xì)胞模型；MTT染色分析廣棗總黃酮對(duì)病毒感染后的He

2、la細(xì)胞及心肌細(xì)胞是否有保護(hù)作用；病毒繁殖抑制實(shí)驗(yàn)比較不同分組間TCID50的差別以驗(yàn)證廣棗總黃酮在Hela細(xì)胞及心肌細(xì)胞上的抗病毒活性；測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞培養(yǎng)上清液中心肌酶LDH、CK-MB的變化；測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子TNF-α含量的變化；運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)定心肌細(xì)胞內(nèi)病毒相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果經(jīng)過在Hela細(xì)胞及心肌細(xì)胞水平的初篩，確定廣棗總黃酮具有保護(hù)心肌細(xì)胞免受CVB3病毒侵襲的作用。病毒繁殖抑制