Lycorine上調(diào)p53非依賴的p21轉(zhuǎn)錄機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、白血病是嚴重危害人類健康的造血組織惡性疾病,目前化學治療仍是白血病治療的主要途徑。Lycorine(石蒜堿)是從我國廣泛分布的多年生草本植物石蒜鱗莖中分離出的一種單體化合物,屬于異喹啉類(isoquinoline)生物堿,具有廣譜的抗白血病作用。本研究以人急性早幼粒白血病細胞株HL-60和人慢性粒細胞白血病細胞株K562作為實驗對象,研究lycorine在白血病細胞中上調(diào)p53非依賴的p21轉(zhuǎn)錄過程中相關(guān)蛋白表達的變化,以及l(fā)ycori

2、ne對p21轉(zhuǎn)錄的靶向特異性,進一步闡明lycorine對白血病p53非依賴的p21轉(zhuǎn)錄的分子機制。
　　 本課題用不同濃度的lycorine作用HL-60細胞和K562細胞24h后,提取總蛋白,通過Western blotting檢測lycorine作用后p53蛋白的表達變化及調(diào)控p21轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白:E2F、Rb、c-myc、HDAC1、HDAC3的表達變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在p53野生型的K562細胞中,lycorine上調(diào)p21

3、的表達不是通過上調(diào)p53來實現(xiàn)的,表明lycorine對p21的調(diào)控是p53非依賴的;隨著lycorine藥物作用濃度的逐漸增大,HL-60細胞和K562細胞中E2F和Rb蛋白表達量上調(diào),c-myc蛋白表達量下調(diào),而HDAC1和HDAC3蛋白表達量沒有明顯差異,表明Rb/E2F途徑及c-myc途徑參與了p21的轉(zhuǎn)錄調(diào)控,HDACs途徑不參與p21的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。另外,為檢測p21靶標的特異性,以p21 Si RNA封閉p21基因的表達后,用

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