原花青素預處理改善全酸蝕粘接系統(tǒng)牙本質(zhì)粘接耐久性的基礎研究.pdf

1、過去幾十年，隨著牙本質(zhì)濕粘接技術的應用及粘接材料的不斷更新?lián)Q代，即刻牙本質(zhì)粘接效果得到顯著改善。然而，由于牙本質(zhì)結構的特殊性和口腔環(huán)境的復雜性，牙本質(zhì)粘接修復體的耐久性仍不盡人意。
　　近年來，國內(nèi)外學者在深入探索牙本質(zhì)粘接界面老化機制的過程中，提出了許多提高牙本質(zhì)耐久性的措施，如使用疏水型粘接劑、抗菌粘接劑、乙醇濕粘接技術、酶抑制劑、再礦化等，以期改善粘接界面的封閉性，增強其耐降解能力，從而一定程度的延長粘接修復體的使用壽命。雖

2、然這些嘗試獲得了令人鼓舞的體外實驗室結果，但是仍然存在一些缺陷尚不能達到臨床應用的要求，因此目前還沒有明確的臨床改進方案可以借鑒和采納。
　　I型膠原作為牙本質(zhì)基質(zhì)的主要成分，正常情況下依靠其分子間和分子內(nèi)交聯(lián)成為牙本質(zhì)基質(zhì)的支架，在維持牙本質(zhì)粘接界面的穩(wěn)定中發(fā)揮重要作用。近年來，組織工程醫(yī)學應用外源性交聯(lián)劑改性膠原支架材料，發(fā)現(xiàn)外源性交聯(lián)劑能進一步促進膠原交聯(lián)，提高膠原機械性能以及抗酶解、水解和化學解離等能力而增強其穩(wěn)定性。由于

3、天然膠原交聯(lián)劑較化學交聯(lián)劑具有良好的生物學相容性而備受關注。受此啟發(fā)，本研究擬選用一種天然膠原交聯(lián)劑原花青素，用與市售粘接系統(tǒng)一致的溶劑包括蒸餾水、乙醇或丙酮配制預處理劑，在牙本質(zhì)酸蝕后、粘接前短暫預處理脫礦牙本質(zhì)，檢測原花青素預處理對脫礦牙本質(zhì)機械性能、形貌，樹脂-牙本質(zhì)即刻粘接強度以及粘接耐久性的影響，并初步探討原花青素與牙本質(zhì)相互作用的機制，以期為臨床操作中改善全酸蝕粘接系統(tǒng)牙本質(zhì)粘接耐久性提供新的思路和方法。
　　第一部分

4、：原花青素預處理對脫礦牙本質(zhì)機械性能和形貌影響的研究
　　將來源于葡萄籽提取物的天然膠原交聯(lián)劑原花青素配制成不同溶劑（蒸餾水、乙醇或丙酮）和不同重量體積比濃度（5％、10％或15％）的預處理劑，用其預處理脫礦牙本質(zhì)，測試預處理后膠原交聯(lián)度、極限拉伸強度和微觀形貌的變化。結果顯示，原花青素預處理后，脫礦牙本質(zhì)膠原交聯(lián)度和極限拉伸強度呈濃度和時間依賴性增加，10％、15％原花青素預處理組顯著高于純?nèi)軇╊A處理空白對照組（P<0.05）。

5、預處理后的脫礦牙本質(zhì)膠原纖維粗細較均一，比陰性對照組排列有序，且不受表面干濕度的影響而始終保持膨松狀態(tài)。不同溶劑預處理組間存在一定的差異，提示不同溶劑對PA活性的發(fā)揮可能有一定影響。
　　第二部分：原花青素預處理對樹脂-牙本質(zhì)即刻粘接性能影響的研究
　　選用目前市場上常用的兩種全酸蝕粘接系統(tǒng)，以水和乙醇為溶劑的AdperTMSingleBond2，以及以水和丙酮為溶劑的Prime&BondNT。用與粘接劑相同溶劑配制的原花青

6、素預處理劑在粘接前預處理脫礦牙本質(zhì)表面120s，測試樹脂-牙本質(zhì)即刻粘接強度的改變以及預處理劑對所用粘接劑固化性能的影響。此外，將預處理時間縮短至臨床可操作范圍內(nèi)60s、30s，評估原花青素短暫預處理能否提高牙本質(zhì)即刻粘接強度。結果顯示，當用AdperTMSingleBond2粘接時，牙本質(zhì)即刻粘接強度隨著原花青素預處理劑濃度的增加而升高，10％、15％原花青素水溶劑組和乙醇溶劑組預處理120s，牙本質(zhì)即刻粘接強度均顯著高于陰性對照組（

7、P<0.05）。而使用Prime&BondNT粘接時，僅15％原花青素水溶劑組和10％原花青素丙酮溶劑組試件粘接強度顯著高于陰性對照組（P<0.05）。因此優(yōu)選AdperTMSingleBond2粘接系統(tǒng)評估縮短原花青素預處理時間對牙本質(zhì)粘接強度的影響。結果發(fā)現(xiàn)15％原花青素預處理60s組，無論水溶劑組還是乙醇溶劑組，牙本質(zhì)即刻粘接強度仍顯著高于陰性對照組（P<0.05）；而當預處理時間縮短至30s時，牙本質(zhì)粘接強度雖高于陰性對照組，但

8、差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。傅里葉紅外光譜檢測發(fā)現(xiàn)，原花青素預處理組與陰性對照組雙鍵轉化率無顯著差異，說明原花青素預處理對受試粘接系統(tǒng)的固化性能無顯著影響。
　　第三部分：原花青素預處理對樹脂-牙本質(zhì)粘接耐久性影響的研究
　　根據(jù)前面兩部分的實驗結果，篩選得出乙醇溶劑配制的10％、15％原花青素預處理處理60s、120s能顯著增加樹脂-牙本質(zhì)粘接強度，故選用該預處理劑進行老化研究，通過測量冷熱循環(huán)和酶降解條件下牙本質(zhì)粘

9、接強度、膠原降解量、納米滲漏以及粘接界面形貌的變化，評估原花青素預處理是否對樹脂-牙本質(zhì)粘接界面具有保護作用。結果顯示，經(jīng)冷熱循環(huán)和酶解老化，原花青素預處理組，尤其是15％原花青素預處理120s組的粘接強度仍顯著高于陰性對照組（P<0.05），膠原降解量和納米滲漏程度顯著低于陰性對照組（P<0.05），且粘接界面結構均一、較完整。提示原花青素預處理能保護樹脂-牙本質(zhì)粘接界面，減緩其溫度老化及酶解老化過程。
　　第四部分：原花青素與

10、牙本質(zhì)相互作用機制的研究
　　首先用拉曼光譜分析原花青素與牙本質(zhì)膠原的作用位點，其次，分析原花青素是否能抑制牙源性溶明膠/溶膠原活性，以及是否具有保護膠原免于次氯酸鈉脫蛋白的作用。結果顯示，原花青素預處理促進膠原分子間的交聯(lián)、聚集，并且能抑制牙源性溶明膠/溶膠原活性。原花青素預處理還能延緩次氯酸鈉對膠原的降解作用。提示原花青素可能通過以上多個方面的共同作用改善并保護牙本質(zhì)粘接界面的穩(wěn)定性。
　　綜上所述，天然交聯(lián)劑原花青素預