葉面噴施肥五種氮肥對葡萄生長發(fā)育及氮代謝相關(guān)基因表達的影響.pdf

1、氮肥的吸收和同化對于植物的發(fā)育和成長非常重要。本研究通過對不同株藤稔葡萄分別噴施尿素、硝酸銨、硫酸銨、氯化銨、硝酸鈉五種分析純肥料，先是測定葡萄枝葉生理性狀，利用萃取法測定處理葉片葉綠素含量，對凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)和胞間CO2濃度(Ci)等光合特性參數(shù)變化情況進行測定，后利用VitisEST數(shù)據(jù)庫中EST序列片段結(jié)合RT-PCR方法克隆與氮代謝相關(guān)的5個酶的編碼基因:硝酸鹽還原酶(NR)，亞硝酸還原酶(

2、NiR)，谷氨酰胺合成酶(GS)，谷氨酸脫氫酶(GDH)和天冬酰胺合成酶(AS)，運用熒光定量PCR法研究了上述各基因在葡萄葉面不同處理后的表達情況。旨在為葡萄栽培管理以及科學(xué)施肥提供一定理論依據(jù)，對氮肥的合理應(yīng)用具有一定指導(dǎo)意義。具體主要研究結(jié)果如下:
　　1.本研究選取3個位于固定節(jié)位的新梢于施肥前和施肥后15d測量其新梢長和成熟葉的長與寬，計算新梢增長率和葉片增長率以及葉面積。使用游標(biāo)卡尺測量果實縱橫徑，通過電子天平稱量單個

3、果實質(zhì)量。結(jié)果表明各處理均能在不同程度上提高葡萄新梢增長率，尿素和硝酸銨處理極大地促進了葉片的生長。對果實影響最大的是硫酸銨和尿素，氯化銨對果實大小影響相對較小。
　　利用英國PP-System公司的CIRAS-1光合測定系統(tǒng)，采用開放式氣路測定凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)和胞間CO2濃度(Ci)等參數(shù)。表明尿素處理對蒸騰速率各時段均有影響且最大，硝酸銨、硫酸銨以及氯化銨對一天中后半時段的蒸騰速率有影響;

4、尿素處理對氣孔導(dǎo)度的影響最大，這與蒸騰速率的處理效果一致;各處理Ci的變化趨勢并不完全一致，但各處理多數(shù)時段的Ci值變大，促進了光合作用的進行;凈光合速率在一天中的變化呈“雙峰”型曲線，各處理對于“午休”時段的凈光合速率影響不明確，對一天中其他時段提高了凈光合速率，其中尿素的影響效果最為顯著。
　　2.運用熒光定量PCR技術(shù)對5個葡萄氮代謝基因VvGHD(JF796045)、VvNiR(JF796046)、VvNR(JF79604