口腔綜合治療臺(tái)水路微生物、生物膜檢測(cè)及其消毒效果的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、口腔綜合治療臺(tái)水路(DentalUnitWaterLines,DUWL)存在嚴(yán)重的微生物污染，微生物以浮游微生物和生物膜兩種形式存在。微生物污染來(lái)源主要包括：供水源本身存在微生物污染、綜合治療臺(tái)口腔設(shè)備回吸作用致微生物倒流入水路和供水管內(nèi)壁的生物膜釋放微生物造成的污染。大量研究證實(shí)，水路中存在銅綠假單胞菌、嗜肺軍團(tuán)菌、非結(jié)核分枝桿菌、假絲酵母菌屬等多種條件致病菌，可能引起醫(yī)院感染的發(fā)生。研究表明，通過(guò)對(duì)口腔綜合治療臺(tái)水路進(jìn)行消毒等處理，

2、可降低微生物濃度，一定程度上預(yù)防和控制醫(yī)院感染的發(fā)生，從而保證醫(yī)患安全。 目的：本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)獨(dú)立水源和市政水源兩種供水方式的口腔綜合治療臺(tái)三用槍噴頭采集的水樣進(jìn)行微生物基線值定量檢測(cè)、微生物種類鑒定及對(duì)銅綠假單胞菌、嗜肺軍團(tuán)菌、大腸埃希氏菌三種條件致病菌定性檢測(cè)，并觀察生物膜結(jié)構(gòu)。采用525mg/L次氯酸鈉對(duì)獨(dú)立水源水路進(jìn)行化學(xué)消毒，比較其消毒前后水路微生物總菌落數(shù)、微生物種類、三種條件致病菌檢出率的差異及生物膜結(jié)構(gòu)的變化，以研究

3、次氯酸鈉消毒劑對(duì)水路消毒的效果和方法，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)水路消毒的必要性，同時(shí)為本學(xué)科在DUWL的感染控制方面提供消毒學(xué)、流行病學(xué)等理論基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：選擇40臺(tái)口腔綜合治療臺(tái)，采集三用槍水樣進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)48h計(jì)算總菌落數(shù)；采用觸酶實(shí)驗(yàn)、生化鑒定、VITEK-全自動(dòng)微生物鑒定儀等方法檢測(cè)水樣中微生物種類，并按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)銅綠假單胞菌、嗜肺軍團(tuán)菌、大腸埃希氏菌三種條件致病菌進(jìn)行定性檢測(cè)。同時(shí)，從口腔綜合治療臺(tái)水路三用槍近工作端連

4、接管內(nèi)壁采集生物膜樣本，通過(guò)細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)生物膜中微生物的總菌落數(shù)，并采用激光共聚焦掃描顯微鏡(ConfocalLaserScanningMicroscopy,CLSM)和掃描電鏡(ScanningElectronicMicroscope,SEM)觀察生物膜結(jié)構(gòu)。選用525mg/L次氯酸鈉消毒劑，采用沖洗消毒方法對(duì)獨(dú)立水源口腔綜合治療臺(tái)水路進(jìn)行化學(xué)消毒后，采集水樣和生物膜樣，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)并菌落計(jì)數(shù)、鑒定微生物種類及定性檢測(cè)水樣中三種條件致

5、病菌的檢出率，并觀察生物膜結(jié)構(gòu)。結(jié)果采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行兩樣本t檢驗(yàn)、配對(duì)t檢驗(yàn)和單因素方差分析，α設(shè)在0.05。 結(jié)果：①消毒前DUWL微生物菌落數(shù)基線檢測(cè)結(jié)果：獨(dú)立水源和市政水源口腔綜合治療臺(tái)水路的總菌落數(shù)幾何均值分別為2.23×103CFU/ml和5.32×103CFU/ml，統(tǒng)計(jì)分析顯示，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，均超過(guò)美國(guó)牙醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)(AmericanDentalAssociation，ADA)口腔醫(yī)

6、療用水的標(biāo)準(zhǔn)(菌落數(shù)≤200CFU/ml)。獨(dú)立水源和市政水源口腔綜合治療臺(tái)水路分別鑒定出八種和十二種細(xì)菌，優(yōu)勢(shì)菌為革蘭氏陰性桿菌，如皮氏/湯氏羅爾斯頓菌、魯氏/瓊氏不動(dòng)桿菌、醋酸鈣-鮑氏不動(dòng)桿菌等。所檢測(cè)的三種條件致病菌檢出結(jié)果為：獨(dú)立水源與市政水源DUWL銅綠假單胞菌檢出率分別為35％(7/20)和30％(6/20)，大腸埃希氏菌檢出率分別為0和15％(3/20)；所有水樣均未檢出嗜肺軍團(tuán)菌。消毒前獨(dú)立水源和市政水源DUWL生物膜總

7、菌落數(shù)幾何均值分別為1.7×103CFU/cm2和9.5×103CFU/cm2，P>0.05，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CLSM及SEM觀察結(jié)果顯示，獨(dú)立水源和市政水源口腔綜合治療臺(tái)水路內(nèi)壁生物膜結(jié)構(gòu)相似，呈柵欄狀，并伴有桿菌與球菌分布于基質(zhì)中。②獨(dú)立水源DUWL消毒5周，每周微生物總菌落數(shù)幾何均值均為0，與消毒前基線比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，消毒后所有口腔綜合治療臺(tái)水路水樣總菌落數(shù)均符合ADA口腔醫(yī)療用水水質(zhì)要求。消毒后獨(dú)立水源

8、口腔綜合治療臺(tái)水路水樣中鑒定出三種細(xì)菌，其中泡囊短波單胞菌(Brevundimonasvesicularis)和施氏假單胞菌(Pseudomonasstutzeri)消毒前未檢出。三種條件致病菌均未檢出。獨(dú)立水源口腔綜合治療臺(tái)水路消毒前、后生物膜菌落數(shù)幾何均值分別為1.7×103CFU/cm2、0CFU/cm2，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。CLSM及SEM觀察結(jié)果顯示，生物膜結(jié)構(gòu)受到一定程度破壞，但基質(zhì)仍然存在。 結(jié)論：①

9、口腔綜合治療臺(tái)水路存在微生物污染，并且檢出銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌兩種條件致病菌，同時(shí)口腔綜合治療臺(tái)水路內(nèi)壁生物膜含有高密度細(xì)菌，存在引起醫(yī)院感染的潛在風(fēng)險(xiǎn)，為保證醫(yī)療安全，有必要對(duì)口腔綜合治療臺(tái)水路進(jìn)行消毒處理。②525mg/L次氯酸鈉消毒劑對(duì)口腔綜合治療臺(tái)水路具有較好的消毒效果，能有效地殺滅微生物與條件致病菌，并在一定程度上破壞生物膜結(jié)構(gòu)。次氯酸鈉消毒劑可常規(guī)應(yīng)用于臨床口腔綜合治療臺(tái)水路的消毒處理。③市政水源口腔綜合治療臺(tái)水路與市