含NGF、NT-3、BDNF的聚乳酸—羥基乙酸(PLGA)微球?qū)D大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:以PLGA(PLA∶ PGA=85∶15)做為微球系統(tǒng)囊壁材料，內(nèi)容物采用NGF、NT-3、BDNF，制造出直徑約300um的高分子緩釋微球，植入受損的大鼠坐骨神經(jīng)，以證明該種微球?qū)τ诖笫笞巧窠?jīng)損傷的修復(fù)有一定作用。
　　方法:使用PLGA為材料，溶于二氯甲烷后，加入含NGF、NT-3、BDNF的磷酸鹽緩沖液，通過攪拌、超聲乳化、過濾、離心等步驟后，制成含神經(jīng)營養(yǎng)因子的高分子微球。并檢測(cè)微囊的體外釋放效果。然后取30只成年

2、SD大鼠做為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組，在大鼠左下肢梨狀肌下方約1 cm處顯露坐骨神經(jīng)，切斷后予以端端吻合，實(shí)驗(yàn)組在坐骨神經(jīng)吻合處沿坐骨神經(jīng)行徑縱行植入高分子微球6顆。對(duì)照組僅吻合神經(jīng)。在術(shù)后6周觀察各組SD大鼠的坐骨神經(jīng)功能恢復(fù)情況，并于6周后各組術(shù)側(cè)進(jìn)行小腿三頭肌濕重測(cè)定、電生理檢測(cè)、組織切片等測(cè)定。并取出使用后微囊再次測(cè)定體外釋放效果并與前面數(shù)據(jù)作對(duì)比。
　　結(jié)果:1.微球順利制成。
　　2.植入微球后的SD大鼠實(shí)驗(yàn)

3、組死亡一只、對(duì)照組死亡兩只，不計(jì)入實(shí)驗(yàn)結(jié)果。其余SD大鼠術(shù)后實(shí)驗(yàn)組坐骨神經(jīng)功能恢復(fù)明顯優(yōu)于對(duì)照組。小腿三頭肌測(cè)定發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組大鼠小腿三頭肌重量明顯高于對(duì)照組。（統(tǒng)計(jì)學(xué)指標(biāo)P＜0.01）電生理檢測(cè)中實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)傳導(dǎo)速度及最大波幅明顯優(yōu)于對(duì)照組。（統(tǒng)計(jì)學(xué)指標(biāo)P＜0.01）組織切片中可見實(shí)驗(yàn)組新生神經(jīng)纖維數(shù)量多，較密集，排列均勻，并可見新生的毛細(xì)血管，且髓鞘相較對(duì)照組要厚。對(duì)照組神經(jīng)纖維數(shù)量及密集程度均少于實(shí)驗(yàn)組，并且排布不均，較散亂。
　

4、　3.制得微球在溶液中可持續(xù)釋放神經(jīng)營養(yǎng)因子，前5天釋放量較少，5日后釋放速度明顯增高，并在10-15日左右達(dá)到高峰，并維持至45日左右，在45日后釋放量逐漸開始下降，但60日時(shí)仍可測(cè)得溶液內(nèi)有神經(jīng)營養(yǎng)因子釋放。
　　4.SD大鼠體內(nèi)所取出使用后微球再次進(jìn)行體外釋放測(cè)試時(shí)發(fā)現(xiàn)其仍具有持續(xù)釋放效果。
　　結(jié)論:1.以PLGA做為微球系統(tǒng)的材料可有助于周圍神經(jīng)修復(fù)。
　　2.搭載NGF、NT-3、BDNF三種神經(jīng)營養(yǎng)因子的