柑桔種子中類檸檬苦素提取純化工藝研究.pdf

1、類檸檬苦素在柑桔屬中含量豐富，是柑桔主要的次生代謝產(chǎn)物之一，也是引起柑桔汁苦味的重要原因。柑桔類檸檬苦素具有抗癌、殺蟲、抗病毒、抑菌等生物學活性，有著廣泛的應用前景。 本文以錦橙種子為原料，在研究建立紫外分光光度法快速測定類檸檬苦素的方法基礎上，采用單因素實驗和響應曲面法優(yōu)化了超聲輔助法和水溶助劑法提取類檸檬苦素的工藝條件，并初步開展了大孔樹脂純化分離純化的研究。其主要研究結果如下： (1)以DMAB作為指示劑，進行比色

2、分析，確定檸檬苦素標準品掃描最大波長為470nm，建立吸光度與濃度的線性回歸方程為y=0.0028x+0.0047，R2=0.9945。其平均回收率在91.30％到94.48％之間。此法不需要昂貴的設備，操作簡單，具有較高的靈敏度，可快速準確的檢測出柑桔種子中類檸檬苦素的總量。 (2)用不同的有機溶劑提取類檸檬苦素，氯仿提取效果最好，其次為丙酮和乙腈，綜合考慮安全性以及回收利用、經(jīng)濟成本等問題，本實驗選擇丙酮作為超聲輔助的提取溶

3、劑。 (3)通過單因素實驗得出的最佳提取工藝參數(shù)為：離心脫脂時間為10min，濃度為80％的丙酮溶液，料液比為1：40，提取時間為30min，提取次數(shù)為2次。 (4)利用響應面分析法確定了主要影響因素：提取劑濃度、料液比、提取試劑三者之間的最佳比例關系，按三元二次正交組合設計原理進行設計，得到了回歸方程為：Y=4.253534+0.285534*X1+0.085791*X2+0.114783*X3-0.234684*X1

4、*X1-0.136576*X2*X2-0.133032*X3*X1+0.081444*X3*X2-0.105576*X3*X3并根據(jù)響應面值典型分析求得了試劑濃度、料液比、提取時間的最佳組合值分別為：85％、47：1、32min，其對應的響應值類檸檬苦素得率為4.362mg/g，而根據(jù)此組合實際測得值為4.297mg/g，與預測量的RSD為1.06％。 (5)在相同條件下，分別用兩種水溶助劑Na-Sal和Na-CuS提取類檸檬苦

5、素，Na-CuS提取效果較好，得率為4.023mg/g，故選用Na-CuS為提取劑，并通過單因素實驗和正交實驗確定最佳的提取類檸檬苦素的工藝參數(shù)。 (6)通過單因素實驗得出用Na-CuS提取類檸檬苦素的最佳工藝參數(shù)為：提取時間為6h，提取劑濃度為2mol/L，溫度為40℃，提取劑用量為20mL。 (7)通過正交實驗得出用Na-CuS提取類檸檬苦素的最佳工藝參數(shù)為：提取時間為6h、提取劑濃度為2.5mol/L、溫度為40℃

6、、提取劑用量為25mL，影響因素大小為提取劑濃度>提取劑用量>溫度>提取時間。在此最佳工藝下提取得率為4.322mg/g。 (8)比較了AB-8、HZ-841、DM130、D3520、XAD-16五種大孔樹脂的飽和吸附量、吸附率和解吸率，選定XAD-16作為類檸檬苦素的樹脂。它的吸附率為94.12％，吸附量是43.58mg/g，解吸率是85.36％。 (9)XAD-16大孔樹脂純化類檸檬苦素的工藝路線中各因素為：上樣流速