液態(tài)發(fā)酵美味牛肝菌生成殼聚糖的研究.pdf

1、殼聚糖（Clutosan，簡(jiǎn)稱CS）又稱聚氨基-D-葡萄糖，是幾丁質(zhì)的脫乙酰產(chǎn)物，它是自然界中唯一存在的堿性多糖。由于其特殊的性質(zhì)，殼聚糖被廣泛應(yīng)用在藥物制劑學(xué)、印染、化工、食品、農(nóng)業(yè)等方面。目前，殼聚糖的工業(yè)化生產(chǎn)原料主要來自于蝦、蟹的外殼，該原料制備殼聚糖的提取方法耗能較高，對(duì)環(huán)境有污染，且原料受季節(jié)和產(chǎn)地的影響較大。自從上世紀(jì)證實(shí)在真菌菌絲體細(xì)胞壁中有甲殼素存在以來，有關(guān)從真菌菌絲中提取殼聚糖的報(bào)道不斷涌現(xiàn)。但是大部分研究側(cè)重于提

2、取方法的研究，對(duì)高產(chǎn)菌株的篩選與培養(yǎng)條件的優(yōu)化的研究卻不多。本實(shí)驗(yàn)主要通過利用對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏的擔(dān)子菌門牛肝菌科的美味牛肝菌液態(tài)發(fā)酵，研究得出高產(chǎn)殼聚糖的菌株培養(yǎng)基主要組成成分和培養(yǎng)條件，并對(duì)發(fā)酵液中分離提取的目的物進(jìn)行測(cè)定，主要研究結(jié)果如下：
　　 實(shí)驗(yàn)首先通過對(duì)美味牛肝菌液態(tài)發(fā)酵生成殼聚糖的主要營(yíng)養(yǎng)成分，碳源、氮源及實(shí)驗(yàn)條件的單因子優(yōu)化，確定了美味牛肝菌發(fā)酵的最佳基礎(chǔ)培養(yǎng)基，結(jié)果表明美味牛肝菌發(fā)酵生成殼聚糖的最佳碳源是葡萄糖，氮

3、源是酵母浸出粉。并對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行單因子優(yōu)化，結(jié)果表明：在250mL三角瓶中美味牛肝菌的液態(tài)發(fā)酵生成殼聚糖的最適pH5.5，溫度28℃，裝液量80mL，發(fā)酵天數(shù)6天。
　　 在單因子研究基礎(chǔ)上選擇葡萄糖，酵母浸出粉和對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較為明顯的兩個(gè)發(fā)酵條件因素pH，裝液量共四因子，使用DPS數(shù)據(jù)處理軟件，設(shè)計(jì)響應(yīng)曲面統(tǒng)計(jì)方法（RSM），優(yōu)化出美味牛肝菌發(fā)酵生成殼聚糖的最佳條件。結(jié)果顯示：以250mL三角瓶作為發(fā)酵搖瓶，采用葡萄糖30

4、.53g/L作為碳源，酵母浸出粉7.02g/L作為氮源，在發(fā)酵溫度為28℃，裝液量達(dá)77.42mL，起始pH為5.64的條件下發(fā)酵6天，獲得殼聚糖最大積累量為3.81g/L，占菌絲體干重的15.43％。實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證結(jié)果表明該方程有較好的擬合性。
　　 通過對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行紅外光譜（IR）和紫外光譜（UV）的定性分析，確認(rèn)了從美味牛肝菌中提取的物質(zhì)為殼聚糖，并且達(dá)到了較高的脫乙酰度和純度，具有較好的品質(zhì)。
　　 利用從美味牛肝菌中