麻枳降濁方對便秘型腸易激綜合征模型大鼠腸組織MC的影響.pdf

1、目的:本研究通過冰水灌胃法建立便秘型腸易激綜合征(irritablebowelsyndrome，IBS)大鼠模型后，應(yīng)用麻枳降濁方對其進(jìn)行干預(yù)性治療，通過觀察大鼠的一般情況、腸道的病理形態(tài)學(xué)變化以及采用甲苯胺藍(lán)改良法染色后觀察大鼠回盲部、結(jié)腸組織內(nèi)肥大細(xì)胞(mastcell，MC)個數(shù)的變化。探討麻枳降濁方對便秘型腸易激綜合征的治療作用及其治療機(jī)制，從而為臨床上麻枳降濁方治療便秘型腸易激綜合征提供實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
　　方法

2、:
　　(1)基線期:本研究選用清潔級健康雄性wistar大鼠40只，體重140±20g，大鼠均采用分籠獨(dú)立飼養(yǎng)，籠底接紗網(wǎng)收集糞便。適應(yīng)性飼養(yǎng)7天，正常生長后入選。
　　(2)造模期:將40只大鼠隨機(jī)分為兩組，A組為正常對照組，共8只，給予正常飼食、飲水，不灌胃;B組為造模組32只，每天8:30灌胃1次，給予0-4℃生理鹽水2ml，造模期共14天，觀察大鼠灌胃后24h的糞便含水量，并記錄。每隔7天測一次大鼠體重。
　

3、　(3)干預(yù)性治療期:造模成功后A組大鼠正常飼食，飲水，不予灌胃。將B組隨機(jī)分為4組，分別為模型對照組、西藥對照組、中成藥對照組及麻枳降濁方組，每組各8只大鼠，除模型對照組大鼠給予蒸餾水2ml/d以外，其余給予藥物干預(yù)性治療，藥物劑量按照體表面積換算，西藥對照組給予西沙必利3.6mg/kg/d，中成藥對照組大鼠給予復(fù)方蘆薈膠囊0.36g/kg/d，麻枳降濁方組大鼠給予麻枳降濁方6.3g/kg/d，干預(yù)性治療期共2周。觀察灌胃后24h各組

4、大鼠糞便含水量的變化情況，并記錄，每隔7天測一次大鼠體重，觀察各組大鼠體重的變化。
　　(4)評價期:末次給藥后，禁食不禁水24h。處死大鼠留取標(biāo)本。處死后迅速開腹取出全胃腸組織，測量幽門到回盲部的距離。然后迅速取各組大鼠的回盲部、結(jié)腸(距肛門5cm)各0.5cm，立即用生理鹽水沖洗，10％的中性甲醛固定液固定，常規(guī)石蠟包埋切片。在光鏡下觀察腸道組織的病理改變，取各組大鼠的回盲部和結(jié)腸的石蠟切片，每例每部位取3張，MC染色采用甲苯

5、胺藍(lán)改良染色法，光學(xué)顯微鏡下觀察，進(jìn)行MC計(jì)數(shù)。
　　結(jié)果:
　　(1)大鼠一般情況:造模后大鼠毛色無光干枯，精神易激惹，肢體無畸形，進(jìn)食量減少糞便形態(tài)趨向于橢圓球狀，灰褐色或灰白色，質(zhì)硬，便長不均勻，長0.4-0.6cm之間，提示造模成功。干預(yù)性治療后大鼠毛色轉(zhuǎn)光澤，精神緊張感好轉(zhuǎn)，肢體無畸形，進(jìn)食量增加，糞便形態(tài)趨向于正常，黃褐色，便長約0.7cm。提示復(fù)方蘆薈膠囊、西沙比利及麻枳降濁方對IBS-C模型大鼠的治療均有效。

6、
　　(2)腸組織病理形態(tài):腸黏膜上皮組織的結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞排列整齊，未見器質(zhì)性病變，較符合人體的生理病理變化。
　　(3)MC的一般觀察:采用甲苯胺藍(lán)改良染色法染色后，光學(xué)顯微鏡可見MC分布于黏膜下層以及黏膜固有層內(nèi);細(xì)胞質(zhì)被甲苯胺藍(lán)染成紫紅色，細(xì)胞核為藍(lán)色，見部分MC呈脫顆粒狀態(tài)，細(xì)胞形態(tài)改變。
　　(4)MC的計(jì)數(shù):模型對照組、西藥對照組、中成藥對照組及麻枳降濁方組大鼠回盲部MC計(jì)數(shù)分別較正常對照組增多(P＜0.0

7、5);西藥對照組、中成藥對照組及麻枳降濁方組大鼠回盲部MC計(jì)數(shù)分別較模型對照組為減少(P＜0.05);西藥對照組、中成藥對照組及麻枳降濁方組之間大鼠回盲部MC計(jì)數(shù)進(jìn)行對比未見顯著差異(P＞0.05)。模型對照組、西藥對照組、中成藥對照組及麻枳降濁方組大鼠結(jié)腸組織MC計(jì)數(shù)分別較正常對照組增多(P＜0.05);西藥對照組、中成藥對照組及麻枳降濁方組大鼠結(jié)腸組織MC計(jì)數(shù)分別較模型對照組為減少(P＜0.05);西藥對照組、中成藥對照組及麻枳降濁

8、方組之間大鼠結(jié)腸組織MC計(jì)數(shù)進(jìn)行對比未見顯著差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:造模期結(jié)束后，觀察B組大鼠糞便的形態(tài)較前變小及其含水量也減少，腸組織常規(guī)病理學(xué)觀察可見細(xì)胞整齊，組織完整，未見器質(zhì)性改變，提示造模成功。治療后糞便形態(tài)及含水量均趨向正常，但與正常對照組大鼠對比仍存在一定差異，提示干預(yù)性治療期較短，尚未達(dá)到治愈。模型對照組大鼠回盲部及結(jié)腸組織MC計(jì)數(shù)較正常對照組增多，提示MC與IBS的發(fā)病存在密切關(guān)系，同時各治療組經(jīng)干預(yù)性