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文檔簡介
1、目的:研究鎳鉻,鈷鉻,純鈦,鈀基,金鉑5種常用烤瓷合金對小鼠肺成纖維細胞(L929)細胞凋亡信號分子基因表達水平與蛋白表達水平的影響。
方法:(1)鎳鉻,鈷鉻,純鈦,鈀基,金鉑5種烤瓷合金分別經(jīng)過1次熔鑄,獲得片狀試件并分別使用DMEM細胞培養(yǎng)液進行浸提72小時后獲得上述5種烤瓷合金試件的浸提液;(2)Real-timeqPCR檢測上述5種烤瓷合金浸提液培養(yǎng)L929細胞48小時后各合金組以及陰性對照組細胞胞質中Caspase-
2、3、Caspase-8、Caspase-9、細胞色素C、Bax,Bcl-2、Fas、Fasl等信號分子的mRNA表達水平的變化;(3)Westernblot檢測上述5種烤瓷合金測試試件的浸提液培養(yǎng)L929細胞48小時后各合金組以及陰性對照組細胞胞質中Caspase-3和Caspase-9蛋白表達水平的變化。
結果:(1)經(jīng)過Real-timeqPCR檢測發(fā)現(xiàn):金鉑合金組和鈀基合金組Bcl-2的mRNA的相對表達量大于陰性對照組
3、(P<0.05);鎳鉻合金組Bax的mRNA相對表達量大于陰性對照組(P<0.05);鎳鉻合金組與純鈦合金組Caspase-9和Caspase-3的mRNA的相對表達量大于陰性對照組(P<0.05);5種烤瓷合金組Caspase-8的mRNA相對表達量均小于陰性對照組(P<0.05);金鉑合金組細胞色素C的mRNA相對表達量小于陰性對照組(P<0.05);其他4個合金組細胞色素C的mRNA相對表達量均大于陰性對照組(P<0.05);鎳鉻
4、合金組、鈀基合金組、金鉑合金組和鈷鉻合金組Fas的mRNA相對表達量大于陰性對照組(P<0.05);鎳鉻合金組、鈀基合金組和鈷鉻合金組Fasl的mRNA相對表達量大于陰性對照組(P<0.05)。
(2)經(jīng)過Westernblot檢測發(fā)現(xiàn):5種烤瓷合金組的Caspase-9蛋白的表達均高于陰性對照組(P<0.05);金鉑合金組、鈀基合金組、純鈦合金組以及鈷鉻合金組的L929細胞胞質中Caspase-3蛋白的表達高于陰性對照組(P
5、<0.05);鎳鉻合金組的L929細胞胞質中Caspase-3蛋白的表達低于陰性對照組(P<0.05)。
結論:(1)不同烤瓷合金在細胞培養(yǎng)液中析出的不同離子將會對細胞凋亡相關信號分子的mRNA和蛋白表達產(chǎn)生不同程度的影響;(2)鎳鉻、鈷鉻、純鈦、鈀基和金鉑等5種常用烤瓷合金可能不通過外源性信號轉導途徑誘導細胞凋亡;(3)鎳鉻、鈷鉻、純鈦、鈀基和金鉑等5種常用烤瓷合金可能通過內(nèi)源性信號轉導途徑誘導細胞凋亡;(4)金鉑合金和鈀基
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