黃芪、大黃影響大鼠腎MsC增生及表達(dá)TGF-β1的比較研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀(guān)察黃芪、大黃對(duì)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)下體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(primarymesangialcells,MsC)增生的影響及對(duì)MsC表達(dá)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transforminggrowthfactor–β1,TGF–β1)的影響,探討黃芪、大黃對(duì)腎小球系膜細(xì)胞增殖的抑制效果。
　　方法：培養(yǎng)及鑒定大鼠原代腎小球系膜細(xì)胞,并用于實(shí)驗(yàn):首先提取大鼠腎小球并用Ⅳ型膠原酶消化處理,

2、然后體外培養(yǎng)大鼠腎小球,對(duì)生長(zhǎng)的細(xì)胞定期行光鏡及免疫組化等鑒定。在細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,利用脂多糖誘發(fā)大鼠腎小球系膜細(xì)胞增生模型,將系膜細(xì)胞分為控制組、模型組、對(duì)照組、黃芪組、大黃組、雷公藤多甙組,通過(guò)MTT法檢測(cè)黃芪、大黃對(duì)MsC增殖的影響;采用ELISA法檢測(cè)黃芪、大黃對(duì)MsC表達(dá)TGF–β1的影響。
　　結(jié)果：培養(yǎng)的腎小球3d后可見(jiàn)到有細(xì)胞生長(zhǎng),14d時(shí)鏡下細(xì)胞多呈短梭形,28d時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)密集,呈星射狀或紡錘形,免疫組化示結(jié)蛋白

3、陽(yáng)性。模型組MsC增生活躍,OD值明顯高于控制組(P<0.01或P<0.05);模型組TGF-β1含量明顯升高,與控制組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),說(shuō)明造模成功。中藥黃芪、大黃均能抑制MsC的增殖,降低對(duì)TGF-β1過(guò)表達(dá),12h以黃芪抑制作用較強(qiáng),24h以大黃抑制作用較強(qiáng),48h兩者相比無(wú)顯著性差異。
　　結(jié)論：培養(yǎng)的細(xì)胞為大鼠腎小球系膜細(xì)胞;中藥黃芪、大黃均能夠抑制體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞的增殖,能抑制MsC對(duì)T