一株具有抑菌活性的越橘內(nèi)生細(xì)菌的研究.pdf

1、本論文以越橘野生種及栽培品種成年植株為材料，進(jìn)行了內(nèi)生細(xì)菌的分離及篩選，獲得1株對真菌具較強(qiáng)抑制活性的菌株，并對其進(jìn)行了鑒定，同時還對該菌株的培養(yǎng)條件、在越橘體內(nèi)的定殖及抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行了研究。 研究結(jié)果表明，材料來源、取材部位、表面消毒方法及分離方法都直接影響內(nèi)生細(xì)菌的分離效果，野生種、根部、組織勻漿法分離到的內(nèi)生菌數(shù)量較多。用12種病原真菌對本研究分離到的21株內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行了篩選，結(jié)果表明，其中一個菌株對菜豆銹病(Uromy

2、ces appendiculatus)抑菌率達(dá)70.5％，對兩種越橘葉斑病病原菌Pestalotiopsis sp．和Cylindrocladium colhounii的抑制率分別達(dá)68.6％和57.7％。形態(tài)學(xué)、生理生化及分子生物學(xué)鑒定結(jié)果表明，該菌株為粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens)，這是國內(nèi)外首次報道從越橘中分離到Serratia marcescens，將其命名為Serratia marcescens DUT

3、。 培養(yǎng)條件的研究結(jié)果表明，DUT菌株培養(yǎng)8h可達(dá)對數(shù)生長期，24 h～32 h為穩(wěn)定生長期，32 h以后為衰老期。該菌在pH3.5～9.5、溫度20℃～37℃都能生長，最適生長pH為7，最適生長溫度為28℃。實(shí)驗(yàn)對用于培養(yǎng)DUT菌株的葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化，優(yōu)化后培養(yǎng)基配方為：葡萄糖10 g/L，硫酸銨10 g/L，檸檬酸鈉1 g/L，磷酸氫二鉀0.3 g/L，硫酸鎂0.25 g/L。用利福平標(biāo)記后的菌株回接越橘后發(fā)現(xiàn)，在