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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)外源性TNF-α刺激乳腺癌細(xì)胞,研究其促進(jìn)乳腺癌上皮細(xì)胞自我更新的作用及其分子機(jī)制。
方法:用人分泌型細(xì)胞因子TNF-α刺激乳腺癌細(xì)胞后,行成球試驗(yàn)(sphere formation assay),并檢測(cè)其CD44+CD24-的細(xì)胞群(即腫瘤干細(xì)胞群)的比例,比較處理前后干細(xì)胞表型及成球能力變化;通過(guò)Western blot和Real-Time PCR檢測(cè)TNF-α處理后pAKT和EZH2表達(dá)水平;通過(guò)比較干擾EZH
2、2表達(dá)前后乳腺癌細(xì)胞中CD44+CD24-細(xì)胞群的比例及成球能力,闡述TNF-α調(diào)節(jié)乳腺癌細(xì)胞自我更新的機(jī)制。
結(jié)果:外源性TNF-α刺激T47D細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞后,乳腺癌細(xì)胞球體的形成能力明顯增加,CD44+CD24-乳腺癌干細(xì)胞群的比例亦顯著提高;外源性TNF-α通過(guò)激活A(yù)KT信號(hào)通路來(lái)上調(diào)EZH2的表達(dá)、siRNA介導(dǎo)的EZH2表達(dá)下調(diào)能夠阻斷TNF-α對(duì)乳腺癌細(xì)胞自我更新能力的促進(jìn)。
結(jié)論:TNF-α通過(guò)
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