人心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白檢測試劑盒的方法學評價及在ACS患者早期危險分層和預后評估中的臨床研究.pdf

1、第一部分：
　　目的:
　　評價蘭州生物制品研究所研發(fā)的人心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)ELISA檢測試劑盒與已批準上市的同類試劑盒用于臨床診斷檢測性能的等效性及臨床符合性,確定其性能的可接受性。
　　方法:
　　樣本為中國人民解放軍總醫(yī)院住院的疑診ACS患者與解放軍305醫(yī)院健康查體人員的血漿或血清,根據(jù)入選標準和排除標準共入選2

2、40例樣本,對蘭州與荷蘭H-FABP試劑盒采用平行、對照試驗標準檢測,進行方法比較實驗,評價兩者相關性,以及對蘭州H-FABP試劑盒檢測H-FABP的精密度試驗、回收試驗、干擾試驗和穩(wěn)定性試驗來評價其臨床檢測性能。數(shù)據(jù)統(tǒng)計學描述與分析應用SPSS13.0軟件包進行,兩種試驗產(chǎn)品結(jié)果的一致性采用Kappa檢驗和相關分析,采用雙側(cè)檢驗,認為P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　方法比較實驗:在可檢測范圍內(nèi),蘭州與荷蘭

3、試劑盒全自動免疫分析儀測定檢測H-FABP值的相關系數(shù)R=0.96,P<0.001,兩者具有良好的相關性。精密度試驗:蘭州試劑盒檢測H-FABP的批內(nèi)變異系數(shù)為5.7％~8.2%,批間變異系數(shù)為3.9%~4.1%。回收試驗:蘭州試劑盒檢測H-FABP的回收率為93.0%-105.7%。干擾試驗:不同濃度TBIL對正常水平的H-FABP的影響度在-9.57%~2.39%;不同濃度TBIL對異常水平的H-FABP的影響度在-20.71~7.

4、43%。不同濃度TG對正常水平的H-FABP的影響度在-7.33%~10.13%;不同濃度TG對異常水平的H-FABP的影響度在5.07~10.93%。不同濃度溶血血紅蛋白對正常水平的H-FABP的影響度在-9.18%~8.16%;不同濃度溶血血紅蛋白對異常水平的H-FABP的影響度在-9.27%~9.83%。蘭州試劑盒檢測H-FABP診斷ACS的靈敏度為91.8%,特異度為88.7%,正確率為90.4%。荷蘭試劑盒檢測H-FABP診斷

5、ACS的靈敏度為90.3%,特異度為86.8%,正確率為88.8%。采用配對資料McNamara’s test卡方檢驗,結(jié)果顯示兩種產(chǎn)品測定結(jié)果在統(tǒng)計學上無差異(P=0.668,>0.05)。采用Kappa檢驗,結(jié)果顯示兩種產(chǎn)品的測定結(jié)果的一致性很好(Kappa=0.726,P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　1、蘭州生物研究所生產(chǎn)的H-FABP與荷蘭HBT公司生產(chǎn)的H-FABP檢測試劑盒比較,具有良好的相關性;
　　2

6、、在本實驗人群中,蘭州H-FABP試劑盒診斷ACS的靈敏度、特異度和正確率略高于同類上市產(chǎn)品荷蘭HBT公司生產(chǎn)的H-FABP試劑盒。兩組試劑盒診斷ACS的靈敏度、特異度和正確率未顯示統(tǒng)計學差異,兩者比較具有等效性且臨床符合性良好;
　　3、蘭州生物研究所生產(chǎn)的H-FABP檢測試劑盒的臨床檢測性能指標良好,在臨床上具有推廣應用的潛在價值。
　　第二部分：
　　目的：
　　探討自主研發(fā)的H-FABP試劑盒檢測ACS患

7、者H-FABP水平,并聯(lián)合檢測NT-proBNP、CRP、cTnT等心臟標志物,評價其與ACS患者發(fā)生心血管不良事件之間的關系,探討聯(lián)合檢測心臟標志物在ACS患者危險分層及預后評估中的應用價值。
　　方法：
　　2010年3月-2012年3月就診于解放軍總醫(yī)院的疑診ACS患者286例,篩選232例明確診斷急性冠脈綜合癥(ACS)者,包括不穩(wěn)定型心絞痛(UA)、非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)以及ST段抬高心肌梗死(STE

8、MI);臨床治療及隨訪資料完整;排除原有腎功能不全、心功能不全、慢性阻塞性肺部疾病以及原有各種結(jié)締組織疾病、感染、外傷、惡性腫瘤患者。胸痛發(fā)作至住院12小時內(nèi)檢測ACS患者H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT水平,根據(jù)四分位數(shù)進行分組,利用受試者工作特征曲線(receiver operator characteristic curve,ROC曲線),對H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT四種標志物在ACS預后

9、評估中的價值進行系列比較,并對四種標志物聯(lián)合評價方案在ACS預后及危險分層中的價值進行初步探討和分析。
　　結(jié)果：
　　H-FABP在ACS患者中的平均水平為20.98±11.39ng/ml,其預測心血管事件的ROC曲線下面積為0.807,其判斷界值為40.97ng/ml。NT-proBNP、CRP和cTnT的ROC曲線下面積稍低,但均大于0.7,因此對ACS患者心血管事件的發(fā)生均有較好的預測作用。隨訪12月時伴有心血管事件

10、患者的四種標志物檢測水平均明顯高于無心血管事件組患者。根據(jù)四分位值將四種標志物檢測值由低到高分為四組,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各標志物高值組患者心血管事件的發(fā)生率均顯著高于低值組患者,相應其無心血管事件生存率亦明顯低于低值組。COX單因素分析顯示四種心臟標志物均與ACS患者心血管事件的發(fā)生明顯相關。以四種標志物各自的截斷值作為陽性判斷標準進行分組,顯示四種標志物都陽性共有16例,均出現(xiàn)心血管事件,當H-FABP陽性且其他有兩項標志物陽性時,有62.5%

11、的患者隨訪可出現(xiàn)心血管事件。當H-FABP陽性且其他有一項標志物陽性時,其心血管事件的發(fā)生率有所下降,但仍在30%以上。當僅H-FABP陽性時,心血管事件的發(fā)生率為23.1%,仍明顯高于四項標志物均陰性組,后者心血管事件發(fā)生率僅為4.6%。進一步以年齡、性別、高血壓、吸煙、糖尿病、病變血管數(shù)及H-FABP、NT-proBNP、CRP、cTnT四種標志物為自變量,以將隨訪12個月時心血管不良事件為因變量,進行Cox多因素回歸分析,結(jié)果顯示

12、,H-FABP、NT-proBNP、CRP、cTnT為ACS患者出現(xiàn)心血管不良事件的獨立危險因素。
　　結(jié)論：
　　1、H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT的檢測水平與ACS患者心血管事件的發(fā)生密切相關,是ACS患者預后的獨立影響因素。
　　2、國產(chǎn)試劑盒檢測H-FABP并聯(lián)合NT-proBNP、CRP和cTnT檢測可更好地對ACS患者進行早期危險分層,并對預后評估有很好的預測價值。
　　第三部分：

13、
　　目的：
　　探討H-FABP在發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者的危險分層及預后評估中的應用價值。
　　方法：
　　2010年3月-2012年3月就診于解放軍總醫(yī)院并明確診斷急性冠脈綜合癥(ACS)患者,共232例,篩選胸痛發(fā)作至入院6小時內(nèi)檢測cTnT為陰性患者55例,同時檢測H-FABP水平。并在發(fā)病后12、24、48小時內(nèi)動態(tài)連續(xù)檢測H-FABP與cTnT水平,觀察H-FABP與cTnT檢測值的動態(tài)變化

14、及相應患者病情演變,并繪制H-FABP預測發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者演變?yōu)樾募」Ｋ赖腞OC曲線,計算曲線下面積,評價H-FABP預測發(fā)病早期cTnT陰性患者演變?yōu)樾募」Ｋ赖奶禺惗扰c靈敏度。對發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者隨訪觀察12個月,根據(jù)此間是否出現(xiàn)心血管事件分為2組,觀察2組患者在發(fā)病早期H-FABP檢測水平是否存在差異。采用ROC曲線觀察發(fā)病6小時內(nèi)H-FABP檢測水平預測發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者心血管事件的曲線

15、面積,并根據(jù)ROC曲線選擇H-FABP值合適的截斷點,據(jù)此分為H-FABP高值組與低值組,觀察2組患者心血管事件發(fā)生情況及無心血管事件生存率的差異。
　　結(jié)果：
　　出現(xiàn)癥狀6小時內(nèi)檢測cTnT為陰性的ACS患者,隨病情進展cTnT可逐漸增高,在出現(xiàn)癥狀后12小時檢測時達峰值,隨后開始下降,但仍能維持一定水平,在48小時可下降約50%。而H-FABP在出現(xiàn)癥狀6小時內(nèi)即達峰值,12小時輕度下降(12.82%),隨后下降較快,

16、48小時可下降約79%。55例患者有24例在住院期間演變急性心肌梗死,而出現(xiàn)癥狀6小時內(nèi)檢測的H-FABP水平對發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者演變?yōu)樾募」Ｋ谰哂泻芎玫念A測價值,其ROC曲線下面積為0.946,截斷值為15.47ng/ml,預測的靈敏度為87.5%,特異度為90.33%。在隨訪12個月時進行觀察,發(fā)現(xiàn)有11例患者出現(xiàn)心血管事件,發(fā)生心血管事件組患者的H-FABP均值明顯高于無心血管事件組。用ROC曲線分析顯示曲線下面積為

17、0.772,其預測心血管事件的截斷值為44.71ng/ml。我們以該截斷值為標準,將其分為高值組與低值組,結(jié)果顯示在高值組即高危組患者心血管事件的發(fā)生率為54.5%,而在低值組即低危組患者心血管事件的發(fā)生率僅為11.4%,二者差異顯著。高危組患者無心血管事件生存率明顯低于低危組(8.55±1.08VS11.23±1.39)。
　　結(jié)論：
　　對于發(fā)病早期cTnT檢測陰性的ACS患者,H-FABP是危險分層與預后評估的良好指標