樟芝液體發(fā)酵提取物抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、1、采用MTT比色法，對(duì)樟芝生物學(xué)特性試驗(yàn)的88個(gè)提取物進(jìn)行了體外藥理活性的研究。篩選出對(duì)胃癌SGC7901有抑制作用的提取物52個(gè)，對(duì)肝癌HepG2有抑制作用的提取物52個(gè)，對(duì)肺癌A549具有抑制作用的提取物33個(gè)，其中有8個(gè)提取物對(duì)三種癌細(xì)胞都有抑制作用。明確了不同提取物對(duì)同種細(xì)胞的活性作用和最佳作用濃度不同;而同一個(gè)提取物對(duì)不同的靶細(xì)胞活性作用及作用濃度也不同。另外，也檢測(cè)了部分提取物對(duì)人正常組織來(lái)源的肝細(xì)胞HL7702的細(xì)胞毒作

2、用，結(jié)果顯示，無(wú)任何細(xì)胞毒性，且有利于正常細(xì)胞HL7702的增殖。部分提取物與化療藥物聯(lián)合作用，可以減少或抵消化療藥物5Fu的細(xì)胞毒作用，說(shuō)明可以作為化療藥物的輔助藥物進(jìn)行研究和開發(fā)。
　　 2、采用MTT比色法，檢測(cè)了樟芝提取物對(duì)小鼠肝癌H22的體外抑制作用，結(jié)果顯示四樣品均有抑制作用，其中SBAC抑制作用較大，在濃度為15mg/ml時(shí)，抑制率最大為63.07％。對(duì)小鼠肉瘤S180的體外抑制作用結(jié)果顯示:四樣品也都具有抑制作用

3、，其中SBAC在濃度為15mg/ml時(shí)達(dá)到最大77.99％;PAAC濃度為15mg/ml時(shí)，抑制率也達(dá)到最大為79.37％。四個(gè)樟芝樣品與環(huán)磷酰胺聯(lián)合抑制人肝癌HepG2，其抑制作用均減小;而在環(huán)磷酰胺損傷HepG2細(xì)胞后，除PBAC外，均促進(jìn)細(xì)胞的增殖，表明樟芝提取物具有修復(fù)細(xì)胞的作用。
　　 3、依據(jù)GB15193.3-1994急性毒性試驗(yàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)計(jì)了樟芝提取物的急性毒性試驗(yàn)。結(jié)果顯示:在樟芝提取物劑量為22.90g/k

4、g，小鼠的死亡率為25％，不足50％，可以推斷EPAC的LD50大于22.90g/kg體重。按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)半數(shù)致死劑量分級(jí)LD50＞15g/kg的物質(zhì)為無(wú)毒級(jí)物質(zhì)。因此，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示EPAC安全可靠，且在試驗(yàn)期間各組動(dòng)物活動(dòng)正常，毛色光澤度好，無(wú)任何中毒癥狀。
　　 4、采用建立肝癌H22荷瘤小鼠模型的方法，檢測(cè)樟芝提取物SBAC體內(nèi)抗腫瘤作用。測(cè)定了各試驗(yàn)組小鼠的體重、采食量、瘤重等指標(biāo)，結(jié)果顯示:高劑量組(500mg/kg)、

5、中劑量組(250mg/kg)、低劑量組(125mg/kg)，抑瘤率分別為11.02％、42.79％、48.83％，說(shuō)明SBAC對(duì)H22荷瘤小鼠有抑瘤作用。而聯(lián)合組(250mg/kg、5Fu)、陽(yáng)性對(duì)照組(5Fu組)，抑瘤率分別為14.93％、73.67％，且試驗(yàn)過(guò)程中,SBAC組比對(duì)照組體重和采食量均有顯著提高，與化療藥物聯(lián)合作用，減輕了化療藥物對(duì)小鼠機(jī)體的損傷，體重和采食量均有所提高。
　　 5、通過(guò)檢測(cè)脾臟、肝臟、腎臟、胸腺

6、等臟器指數(shù)，測(cè)定自然殺傷細(xì)胞、T/B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的活性，研究了SBAC對(duì)H22荷瘤小鼠有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用，結(jié)果表明:SBAC組的臟器指數(shù)顯著高于對(duì)照組，尤其是胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，最高值分別為4.307、9.563;T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)在劑量為125mg/kg時(shí)最高為0.976，明顯高于對(duì)照組;而SBAC在劑量為250mg/kg時(shí)，NK細(xì)胞活性也最高，達(dá)到200.79％，顯著高于對(duì)照組;SBAC組小鼠的巨噬細(xì)胞在250mg/kg時(shí)，