IL-1β在大鼠角膜上皮抗曲霉菌感染固有免疫階段的表達(dá)及其與Dectin-1受體的關(guān)系.pdf

1、目的:觀察IL-1β在大鼠角膜上皮抗曲霉菌感染固有免疫階段的表達(dá),阻斷Dectin-1受體后,觀察固有免疫階段Dectin-1受體與IL-1β的關(guān)系。
　　 方法:健康的wistar大鼠90只,雌雄不限,在刮除上皮的大鼠角膜涂布以煙曲霉菌菌絲并覆蓋自制角膜接觸鏡,建立角膜真菌感染模型。隨機(jī)分5組,A組6只為空白對(duì)照組:B組30只為真菌感染模型組,D組12只為模型阻斷組,C組30只、E組12只分別為損傷對(duì)照組。均取右眼為實(shí)驗(yàn)眼,B

2、組建立真菌性角膜炎模型,損傷對(duì)照組覆蓋角膜接觸鏡并滴入PBS液;D組給予Dectin-1受體抗體后建立模型,左眼給予PBS后建立模型作為對(duì)照。建模后B、C組分別于4h,8h,16h,24h,D、E組于24h取眼球角膜上皮,運(yùn)用免疫組織化學(xué)和RT-PCR技術(shù)檢測(cè)角膜上皮中Dectin-1受體和IL-1β的表達(dá)。
　　 結(jié)果:IL-1β在空白對(duì)照組和條件對(duì)照組的角膜上皮呈微量表達(dá),在真菌性角膜炎模型建立后IL-1β在角膜上皮中的表達(dá)

3、量隨病變進(jìn)展逐漸增高,建模后16h至24h緩慢增高,各時(shí)間點(diǎn)IL-1β表達(dá)量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。Dectin-1受體在空白對(duì)照組角膜上皮呈基礎(chǔ)表達(dá),在真菌性角膜炎模型建立后Dectin-1受體表達(dá)量明顯增多,差異具有顯著性(P<0.01)。阻斷Dectin-1受體后真菌性角膜炎建模24h的IL-1β表達(dá)量明顯低于未阻斷Dectin-1受體組,差異具有顯著性(P<0.01)。
　　 結(jié)論:1.顯微鏡下觀察大鼠角膜水

4、腫,渾濁,潰瘍形成,HE染色見(jiàn)角膜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),角膜組織刮取物行菌落培養(yǎng)證實(shí)大鼠真菌性角膜炎動(dòng)物模型建模成功。2.IL-1β表達(dá)在真菌性角膜炎上皮中,其表達(dá)量隨病變發(fā)展逐漸增高,提示IL-1β參與真菌性角膜炎的發(fā)生發(fā)展,是真菌性角膜炎病變中的敏感炎性因子。3.Dectin-1受體在空白對(duì)照組呈基礎(chǔ)表達(dá),在建模后Dectin-1表達(dá)量增多,Dectin-1抗體封閉Dectin-1受體后,能顯著減少角膜上皮中IL-1β的量。這提示Dect