IL-1β及其Ⅰ型受體在大鼠肺纖維化發(fā)生過程中的動(dòng)態(tài)表達(dá).pdf

1、研究背景：肺纖維化是一種臨床常見的病理改變，是多種原因不明的間質(zhì)性肺疾病的共同結(jié)局，往往導(dǎo)致肺功能障礙及呼吸衰竭，近年來它的發(fā)生更有增多趨勢[1]。由于其機(jī)制不清，至今仍缺乏肺纖維化的有效治療手段，其病死率較高，預(yù)后極差[2]，故加強(qiáng)對肺纖維化發(fā)病機(jī)制的研究，并在此基礎(chǔ)上發(fā)展新的治療策略就成為非常迫切的現(xiàn)實(shí)需要。目前國內(nèi)外多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，炎癥細(xì)胞及其釋放的細(xì)胞因子在肺纖維化的發(fā)病機(jī)制中起一個(gè)非常重要的作用[3]。IL-1β是體內(nèi)作用最強(qiáng)的

2、前炎癥細(xì)胞因子之一，它廣泛參與了機(jī)體多種疾病的發(fā)生和發(fā)展[4]。有研究報(bào)道，在肺纖維化的大鼠模型和特發(fā)性肺纖維化患者的支氣管肺泡灌洗液中，均可檢測出較高水平的IL-1β[5]，然而IL-1β及其主要受體在肺纖維化的發(fā)病過程中具體是如何動(dòng)態(tài)變化的尚不知曉。本實(shí)驗(yàn)通過建立肺纖維化動(dòng)物模型來研究IL-1β及其Ⅰ型受體在肺纖維化發(fā)生發(fā)展過程中的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，從而為進(jìn)一步探索肺纖維化的發(fā)生機(jī)制及臨床治療提供新的理論依據(jù)。
　　 目的：1.

3、觀察博萊霉素致大鼠肺纖維化發(fā)生過程中肺組織的病理學(xué)改變。
　　 2.測定肺纖維化發(fā)生過程中大鼠肺組織中羥脯氨酸的含量變化。
　　 3.測定肺纖維化發(fā)生過程中大鼠肺組織、血清及肺泡灌洗液中IL-1β及其Ⅰ型受體的動(dòng)態(tài)表達(dá)。
　　 方法：90只Wistar大鼠隨機(jī)分為正常組(n=30)，模型組(n=30)和甲強(qiáng)龍組(n=30)，模型組和甲強(qiáng)龍組經(jīng)氣管內(nèi)注入博萊霉素制備肺纖維化疾病模型，正常組注入生理鹽水。造模當(dāng)日，甲

4、強(qiáng)龍組經(jīng)腹腔內(nèi)注射甲基強(qiáng)的松龍進(jìn)行治療，模型組和正常組給予生理鹽水，此后每日一次。分別于造模后第1，3，7，14，28天處死大鼠(n=6/組)，留取肺組織，對其進(jìn)行HE染色，觀察其病理學(xué)改變，堿水解法測定其中羥脯氨酸的濃度，免疫組化法測定肺組織中IL-1β及其Ⅰ型受體的含量；收集支氣管肺泡灌洗液及血清，ELISA方法檢測其中IL-1β和其Ⅰ型受體的含量。
　　 結(jié)果：1.病理切片顯示模型組大鼠的肺泡間隔明顯增寬，較多纖維母細(xì)胞增

5、生及炎性細(xì)胞浸潤，后期肺組織實(shí)變；甲強(qiáng)龍組各期病理變化較模型組明顯減輕。2.模型組和甲強(qiáng)龍組的羥脯氨酸含量隨造模時(shí)間的延長逐漸升高，均于28天時(shí)達(dá)到峰值，且模型組顯著高于正常組(P＜0.01)，甲強(qiáng)龍組則明顯低于模型組(P＜0.01)。3.免疫組化結(jié)果顯示：模型組肺組織中IL-1β及其Ⅰ型受體的表達(dá)計(jì)分在第7天時(shí)最大，第14天時(shí)有所減小，第28天時(shí)表達(dá)積分基本與正常組相等；甲強(qiáng)龍組于第3、7、14天時(shí)表達(dá)計(jì)分較模型組為小。4.ELISA

6、結(jié)果顯示：模型組大鼠在第7天時(shí)肺泡灌洗液及血清中IL-1β的含量達(dá)到峰值，14天時(shí)顯著下降，但仍高于正常組(P＜0.01)，28天時(shí)基本回到正常水平，Ⅰ型受體的表達(dá)規(guī)律與IL-1β基本相同。甲強(qiáng)龍組IL-1β及其Ⅰ型受體的表達(dá)水平在3，7，14天時(shí)低于模型組(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：IL-1β及其Ⅰ型受體在肺纖維化發(fā)生的肺泡炎階段明顯升高，在肺纖維化階段又顯著下降，其在肺纖維化的發(fā)生過程中呈現(xiàn)早期而短暫的表達(dá)高峰，提示其可