多室脂質體裝載磁共振對比劑Gd-DTPA（DepoGd）的體外成像及體內分布實驗研究.pdf

1、以多室脂質體(DepoFoam)作為載體包封常規(guī)磁共振對比劑Gd-DTPA，得到所需粒徑大小的DepoGd粒子(直徑約13-25μm)，包封率為50％。磁共振體外成像觀察同濃度下DepoGd與Gd-DTPA溶液的信號差別，統(tǒng)計學分析顯示，含Gd摩爾濃度相同的DepoGd與Gd-DTPA原藥溶液的MR體外實驗信號強度無差異。將DepoGd和Gd-DTPA溶液分別經鼠尾靜脈注入小鼠體內，結果表明，近40％的DepoGd停留在了肺內。小鼠體內

2、分布試驗和熒光試驗證實：大粒徑的DepoFoam顆粒與肺實質血管床的小血管直徑相仿，經靜脈注射后能夠在肺毛細血管網(wǎng)停留時間延長，而且藥物在一定時間內主要分布在肺實質內，有很好的肺靶向性。 目的 以多室脂質體(DepoFoam)作為載體，包封常規(guī)磁共振對比劑Gd-DTPA，利用其載藥量高，粒徑大的特點，使其經周圍靜脈注射后可以停留在肺的毛細血管網(wǎng)內，延長對比劑在肺部的停留時間，以期對肺實質進行磁共振靶向成像；首先將新對比劑

3、與常規(guī)對比劑比較，進行磁共振體外成像，同濃度下觀察兩者的信號差別；之后測試該對比劑DepoGd在動物體內的分布情況，觀察其有無肺靶向性；并將紅色熒光脂質加在DepoGd上，注入動物體內，觀察其在肺內的染色情況，以進一步確定其靶向性。 材料與方法 使用膽固醇等脂質成分結合釓噴酸葡胺(Gd-DTPA)，得到DepoGd初乳顆粒，觀察其粒徑大小，優(yōu)化制備方法，調整離心機轉速，得到所需粒徑大小的DepoGd粒子(直徑約13-25

4、μm)。將DepoGd溶液和Gd-DTPA溶液分裝于不同試管中，分成X、Y、Z三組，每組均配成四種濃度的試劑，X為對照組，內含不同濃度的Gd-DTPA原溶液，Y、Z組分別為兩種粒徑的DepoGd溶液，與同字母腳標的Gd-DTPA溶液摩爾濃度相同，在MR機器上掃描，測定信號強度，并與同摩爾濃度的常規(guī)對比劑比較，進行統(tǒng)計學分析。將DepoGd和Gd-DTPA溶液分別經鼠尾靜脈注入小鼠體內，20分鐘后，取小鼠的心、肝、肺、腎和血漿進行樣品分析

5、。采用ICP-AES原子發(fā)射光譜分析法測定釓的含量和濃度，考察釓噴酸葡胺脂質體在體內的分布。取一組小鼠麻醉后經鼠尾靜脈和腸系膜上靜脈分別注入帶有熒光脂質的DepoGd溶液，20分鐘后將小鼠的肝臟、肺臟、腎臟分別取出，切成薄片，放在熒光顯微鏡下觀察臟器內有無熒光染色，以確定新對比劑在肝、肺內有無停留。 結果 通過上述方法得到了平均粒徑在21.61μm左右的DepoGd粒子，直徑大體分布于13μm-25μm之間，成單峰分布，

6、包封率為50％，高于普通脂質體30％左右的包封率。顯微鏡下觀察，可見DepoGd粒子粒徑分布較均勻，結果較好。MR機上進行體外成像，將測得的信號值進行統(tǒng)計學處理，所得XYZ不同溶液組的各組內不同濃度試劑之間的Px、PY、Pz值均＜0.001，有統(tǒng)計學意義，即各組內不同濃度溶液之間的信號是有顯著性差別的。X、Y、Z組的a、b、c、d四種濃度的同濃度試劑之間的P值分別為Pa=0.1045；Pb=0.0637；Pc=0.0660；Pd=0.0

7、639。P值均＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，即含Gd摩爾濃度相同的DepoGd與Gd-DTPA原藥溶液的MR體外實驗信號強度無差異。小鼠組織勻漿實驗證實尾靜脈注射DepoGd以后，近40％的藥物停留在了肺內。經鼠尾靜脈注入帶有紅色熒光的脂質體對比劑DepoGd后20分鐘，取出小鼠肝臟，肺臟和腎臟，在熒光顯微鏡下觀察，見到肺內大量的紅色物質顯像，而肝臟未見到顯像。通過小鼠腸系膜靜脈注入熒光對比劑后，可見到肝臟內大量的紅色熒光染色，而肺臟顯示

8、正常。 結論 DepoFoam能夠包載常規(guī)磁共振對比劑，且Gd-DTPA被包封后理化性質沒有發(fā)生改變，其有效性也沒有明顯變化。體外成像顯示含Gd摩爾濃度相同的DepoGd與Gd-DTPA原藥溶液的MR信號強度是相同的。小鼠體內分布試驗和熒光試驗證實：大粒徑的DepoFoam顆粒(13μm-25μm)與肺實質血管床的小血管直徑相仿，經靜脈注射后能夠在肺毛細血管網(wǎng)停留時間延長，而且藥物在一定時間內主要分布在肺實質內，有很好的