基于固體脂質(zhì)體納米粒的新型磁共振大腸成像方法的建立.pdf

1、研究目的： 本課題以固體脂質(zhì)納米粒(SLN)為載體，負(fù)載釓噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA)而制備納米化MR對(duì)比劑。通過(guò)納米化MR對(duì)比劑直腸給藥后，大腸壁吸收納米化對(duì)比劑后于TIWI的MR上增強(qiáng)顯示及有助于大腸癌的顯示，以建立基于固體脂質(zhì)體納米粒的新型MR大腸成像方法。 材料與方法： 1.主要以硬脂酸及Gd-DTPA為原料，采用乳化.溶劑揮發(fā)法合成Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN及SLN三種納

2、米粒，并對(duì)納米粒進(jìn)行檢測(cè)、體外釋放及體外MR成像。 2.基于納米化對(duì)比劑的正常小鼠大腸MR成像方法的建立及組織細(xì)胞學(xué)定位30只正常小鼠隨機(jī)分5組(Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN、SLN、Gd-DTPA及水)，每組各6只。分別進(jìn)行小鼠乙狀結(jié)腸及直腸灌藥前、保留灌腸中及灌藥后20分鐘MR掃描。測(cè)量每只動(dòng)物灌藥前后大腸壁的Tl值及大腸壁與周?chē)＜∪釩及CNR。此外，選擇2只正常小鼠進(jìn)行靜脈注射Gd-DTPA

3、作為對(duì)照。最后處死動(dòng)物，取正常大腸壁進(jìn)行組織細(xì)胞學(xué)分析。 3.基于納米化對(duì)比劑的大腸癌MR成像方法的初步應(yīng)用2只大腸癌小鼠乙狀結(jié)腸及直腸灌藥(Gd-DTPA-SLN)前、保留灌腸中及灌藥后20分鐘MR掃描。然后處死動(dòng)物，取正常大腸壁進(jìn)行組織學(xué)分析。 結(jié)果： 1.采用乳化-溶劑揮發(fā)法合成Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN及SLN三種納米粒平均粒徑40.8nm-300.8nm，Gd-DTPA-S

4、LN及FITC-Gd-DTPA-SLN中Gd-DTPA包封率分別為55.8％和55％。Gd-DTPA-SLN納米粒在pH7.4的PBS中1h釋放約32％，8h才達(dá)到平衡。體外MR成像顯示Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN中的Gd-DTPA與Gd-DTPA溶液中T1馳豫時(shí)間相當(dāng)。 2.基于納米化對(duì)比劑的正常小鼠大腸MR成像方法的建立及組織細(xì)胞學(xué)定位Gd-DTPA-SLN及FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒

5、保留灌腸T1WI的MR可以獲得與Gd-DTPA保留灌腸MR成像類(lèi)似的明腔MR結(jié)腸成像。由Gd-DTPA-SLN納米粒及FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒保留灌腸20分鐘后T1WI的FLAIR的MR圖像與保留灌腸前相比，所有小鼠大腸壁全層明顯均勻強(qiáng)化，然而SLN納米粒、Gd-DTPA及蒸餾水對(duì)照組小鼠大腸壁信號(hào)強(qiáng)度則無(wú)明顯變化。與MR圖像一致，Gd-DTPA-SLN納米粒及FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒組大腸壁T1馳豫時(shí)間保留

6、灌腸20分鐘后較灌腸前明顯降低，而大腸壁與周?chē)＜∪釩及CNR保留灌腸20分鐘后較灌腸前明顯升高。FITC-Gd-DTPA-SLN保留灌腸20分鐘后大腸壁熒光顯微鏡及激光共聚焦熒光顯微鏡顯示大腸壁各層細(xì)胞核外部分包括細(xì)胞漿及細(xì)胞外間隙內(nèi)均勻分布的由FITC發(fā)射的高濃度綠熒光。Gd-DTPA-SLN、SLN、Gd-DTPA及蒸餾水組保留灌腸20分鐘后大腸壁內(nèi)未見(jiàn)熒光物質(zhì)。對(duì)照組則未見(jiàn)上述MR及組織細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)。 3.基于納米化對(duì)比

7、劑的大腸癌MR成像方法的初步應(yīng)用Gd-DTPA-SLN保留灌腸中T1WI的MR成像可以獲得腫瘤明腔MR結(jié)腸成像。Gd-DTPA-SLN保留灌腸20分鐘后T1WI的MR成像檢查顯示正常腸壁明顯均勻強(qiáng)化，而大腸癌病灶的主體部分強(qiáng)化程度較輕，病灶與正常腸壁對(duì)比鮮明。 結(jié)論： 1.采用乳化-溶劑揮發(fā)法合成負(fù)載Gd-DTPA的固體脂質(zhì)體納米粒具備腸道易吸收、Gd-DTPA負(fù)載量大及包封率高、粒徑適宜及不改變Gd-DTPA的高順磁性

8、等特點(diǎn)。 2.本研究發(fā)揮MR及納米技術(shù)的優(yōu)勢(shì)而建立了基于納米的新型大腸成像方法，其主要特點(diǎn)：經(jīng)直腸給藥，而不需要靜脈用藥；一次灌藥后可以獲得明腔大腸MR成像及大腸壁吸收增強(qiáng)成像；FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒即可用于MR成像，又可用于組織細(xì)胞學(xué)的定位；納米顆粒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞水平的顯像；可能實(shí)現(xiàn)大腸吸收功能的評(píng)價(jià)。 3.基于固體脂質(zhì)體納米粒的新型MR大腸成像方法在大腸癌中的初步應(yīng)用表明該方法具有可行性并有助于