EMs患者卵母細胞的相關研究.pdf

1、研究背景:
　　子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMs)在育齡婦女中的發(fā)病率可達10％-15%,所引起的痛經(jīng)、慢性盆腔痛、性交痛和不育等,嚴重影響了婦女的身體健康和生活質量,因其發(fā)病機制不清且難以診治,已成為當代婦產(chǎn)科學的熱點問題。EMs對生殖力造成的是多方面的損害,據(jù)統(tǒng)計,內(nèi)異癥患者中約有30-50%伴有不孕,嚴重子宮內(nèi)膜異位癥引起的不育治療相當困難。自從1978年世界上首例“試管嬰兒”——英國的LouiseBrow

2、n經(jīng)體外受精誕生,輔助生殖技術(Assisted Reproductive Technology,ART)得到飛速的發(fā)展,對EMs導致不孕的治療上升到一個新的高度。近期一些針對EMs患者體外受精-胚胎移植(In vitro fertilization–embryo transfer,IVF-ET)結局的Meta分析報道指出,EMs患者受精率和種植率明顯低于因其他指征行IVF-ET助孕的婦女。多數(shù)學者認為,EMs患者的子宮內(nèi)膜形態(tài)學質量明

3、顯下降,影響了子宮內(nèi)膜的容受性,進而影響了內(nèi)異癥患者的IVF-ET結局。同時,一些學者也認為,EMs患者卵母細胞質量下降可能是導致不孕的重要機制之一,他們認為EMs不僅影響子宮內(nèi)膜的容受性,還影響卵巢功能和胚胎的發(fā)育。為了更進一步了解IVF-ET結局的差異,本研究從另一角度即卵子本身的質量來探究這一問題。
　　研究目的:
　　從細胞的超微結構和分子水平去深入研究EMs不孕患者卵母細胞質量下降的機制,提高我們對EMs相關不孕的

4、認識,為研究如何改善EMs不孕患者卵母細胞質量提高更多的理論依據(jù)。
　　研究對象和方法:
　　(1)收集2010年2月至2011年12月在我院生殖中心接受輔助生殖技術包括常規(guī)體外受精-胚胎移植(IVF-ET)且合并子宮內(nèi)膜異位癥行常規(guī)長方案治療周期共98個,患者年齡21-38歲,不孕年限0.5-17年?；颊呓?jīng)腹腔鏡或剖腹手術確診,且在接受IVF治療前B超均未見囊腫復發(fā),并排除多囊卵巢綜合癥(Poly cystic ovari

5、an syndrome,PCOS)、子宮腺肌癥、子宮肌瘤等;收集同期150例因單純輸卵管因素接受IVF-ET常規(guī)長方案治療的不孕癥患者作為對照組。比較兩組間IVF-ET結局。統(tǒng)計學方法采用t檢驗和χ2檢驗。
　　(2)收集我院生殖中心2012年4月-2013年1月間因子宮內(nèi)膜異位癥/單純輸卵管因素行IVF-ET常規(guī)長方案治療周期新鮮廢棄卵母細胞共35枚,電鏡觀察其超微結構的改變。
　　(3)同期收集MⅠ期卵母細胞為EMs并有

6、男性/單純男性因素接受單精子卵胞漿注射技術(intra cytopla smicsperm injection,ICSI)不孕癥夫婦廢棄不用的生物材料,進行單卵mtDNA拷貝數(shù)檢測,比較兩組間mtDNA拷貝數(shù)的差異。
　　結果:
　　(1)EMs組與對照組在獲卵數(shù)目、優(yōu)質胚胎數(shù)、臨床妊娠率方面無明顯差異;而2PN受精率、胚胎種植率均低于對照組,組間有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
　　(2)胞質中CG、溶酶體、高爾基體,

7、粗面內(nèi)質網(wǎng)和核糖體等細胞器與對照組相比未發(fā)現(xiàn)明顯異常。在光密度分析、線粒體內(nèi)容物、線粒體長短徑的比例上并未見明顯差異。然而,內(nèi)異癥組線粒體密度遠低于對照組;異常線粒體的比例顯著升高。
　　(3)利用Q-PCR方法檢測卵母細胞內(nèi)mtDNA拷貝數(shù)的變化:EMs患者其卵母細胞內(nèi)mtDNA拷貝數(shù)相較正常人明顯下降。
　　結論:
　　(1)EMs組與對照組在獲卵數(shù)目、優(yōu)質胚胎數(shù)、臨床妊娠率方面無明顯差異;而2PN受精率、胚胎種植