溺水后大鼠腦內(nèi)缺氧誘導(dǎo)因子（HIF-1α）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）表達(dá)與溺水腦損傷相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制黃河水淹溺動物模型，觀察淡水淹溺對腦組織的損傷。探討溺水后大鼠腦內(nèi)缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)與溺水腦損傷的關(guān)系及兩者的相關(guān)性。探索細(xì)胞因子在溺水所致腦損傷發(fā)生中的分子病理機(jī)制，為臨床開辟細(xì)胞因子治療新途徑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 1分組將Wistar大鼠70只，隨機(jī)分為三組，即：Ⅰ正常對照組，動物10只，不經(jīng)淹溺處理；Ⅱ淹溺致死組，動物10只，將大鼠直接淹溺致死；Ⅲ淹溺非致死組

2、，動物50只，，淹溺2分鐘后分別于存活3、6、12、24及40h時(shí)間點(diǎn)，各取10只處死。各組動物按實(shí)驗(yàn)要求行相關(guān)指標(biāo)檢測。 2用經(jīng)皮血氧飽和度監(jiān)測儀動態(tài)檢測動物正常時(shí)、淹溺后即刻、10、30分鐘和1、3、6、12、24及40h的血氧飽和度，以了解體內(nèi)缺氧狀況。 3將各組腦組織作石蠟切片，行HE染色觀察淹溺后腦組織形態(tài)學(xué)改變。 4采用免疫組織化學(xué)方法檢測各組大鼠腦組織HIF-1α和VEGF的表達(dá)。 結(jié)果：

3、 1腦指數(shù)的各組間差異有統(tǒng)計(jì)意義，P＜0.05。正常對照組腦指數(shù)為6.87±0.78，淹溺致死組腦指數(shù)與正常對照組相比明顯增加，P＜0.05；溺水后存活3、12h的動物腦指數(shù)明顯小于淹溺致死組，P＜0.05;而溺水24和40h者與致死組相比有所降低，但P＞0.05。 2正常時(shí)血氧飽和度為97±2％；淹溺后即刻血氧飽和度為52±5％，以后逐漸上升，到12h后已基本恢復(fù)正常。氧飽和度各時(shí)間點(diǎn)間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。

4、 3腦組織形態(tài)學(xué)示正常對照組腦細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，無水腫及出血；淹溺致死組腦組織疏松，腦實(shí)質(zhì)小血管旁間隙及神經(jīng)細(xì)胞周圍間隙增寬，部分神經(jīng)細(xì)胞體積略增大，有腦水腫表現(xiàn)；淹溺非致死組腦水腫于溺水后3h出現(xiàn)，12至24h逐漸加重，24h最重，40h水腫較前略有減輕，并伴部分腦細(xì)胞變性、壞死和出血。 4免疫組織化學(xué)染色示正常對照組腦組織無HIF-1α表達(dá)，VEGF表達(dá)陽性(+)；淹溺致死組HIF-1α表達(dá)陽性(+)，VEGF陽性(+)

5、；非致死組兩者都于淹溺后3h表達(dá)明顯，到12h呈高峰表達(dá)(+++)，以后逐漸下降。各組間HIF-1α和VEGF表達(dá)的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且兩者呈正相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： 1淡水淹溺后機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)的缺氧性腦損傷是與疾病進(jìn)展程度及預(yù)后密切相關(guān)的嚴(yán)重病變，但并非是導(dǎo)致溺死的直接原因。 2細(xì)胞因子HiF-1α在淹溺非致死機(jī)體呈高表達(dá)，并調(diào)節(jié)其下游基因VEGF的表達(dá)增強(qiáng)，對腦組織產(chǎn)生保護(hù)作用，但隨著缺氧狀態(tài)的糾正兩者的表達(dá)逐