匙羹藤總皂甙的分離及其環(huán)糊精包合物制備的研究.pdf

1、匙羹藤(Gymnema sylvestre (Retz.)Schult，簡(jiǎn)稱GS)為蘿蘑科匙羹藤屬(Gymnema R.Br.)類植物，又稱武靴藤、羊角藤、金剛藤，主要含有皂甙、萜類、黃酮、多肽、果膠、生物堿等化學(xué)成分，其主要活性成分是三萜皂甙類物質(zhì)，又稱匙羹藤酸(Gymnamic acid，簡(jiǎn)稱GA)。研究表明，匙羹藤葉提取物具有降血糖、降血脂、抗齲齒、抑制甜味和抑制肥胖等作用，可用來(lái)防治糖尿病和肥胖癥，因此無(wú)論是作為藥品還是保健食品

2、，都具有很好的應(yīng)用前景。 日本、美國(guó)和印度已經(jīng)研究開發(fā)出一系列預(yù)防、治療糖尿病和肥胖癥等的匙羹藤產(chǎn)品，我國(guó)匙羹藤資源豐富，雖有有關(guān)研究報(bào)道，但對(duì)其的研究丌發(fā)利用少，并且匙羹藤提取物具有苦味，影響了其產(chǎn)品的應(yīng)用。因此，本論文以匙羹藤葉為原料，對(duì)匙羹藤總皂甙的提取、分離純化及定性定量分析進(jìn)行了較為深入的研究；采用包合技術(shù)掩蔽匙羹藤提取物的苦味，對(duì)匙羹藤總皂甙-β-環(huán)糊精包合物的制備進(jìn)行了研究，主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：

3、 1、研究了醇提法提取匙羹藤總皂甙工藝條件。以匙羹藤總皂甙粗提物得率為考察指標(biāo)，采用四因素三水平正交試驗(yàn)法優(yōu)選了提取工藝，得最佳提取條件為濃度70％乙醇、料液比1∶6、提取時(shí)間3h、提取次數(shù)2次，總皂甙粗提物得率為9.4％；四因素對(duì)總皂甙粗提物得率的影響主次順序?yàn)樘崛〈螖?shù)>乙醇濃度>提取時(shí)間>料液比。 2、對(duì)匙羹藤總皂甙的薄層色譜分析法和分光光度分析法進(jìn)行研究。選定結(jié)構(gòu)類似物甘草酸單銨鹽為對(duì)照品，氯仿∶甲醇∶水(

4、6.5∶3.5∶1下層v／v)為展丌劑，進(jìn)行薄層色譜定性鑒別，匙羹藤酸的Rf值為0.63，經(jīng)5％的硫酸．乙醇顯色后，顯紫紅色斑點(diǎn)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。GA和甘草酸均為齊墩果烷型三萜皂甙，分子量相近，并且經(jīng)香草醛一冰醋酸和高氯酸(1∶4)混合液顯色后均在545nm附近有最大吸收，在此波長(zhǎng)下測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=0.0006C+0.3305，相關(guān)系數(shù)R=0.996,線性范圍40～160μg／mL，精密度試驗(yàn)RSD值為1.18％(n=5)，實(shí)驗(yàn)在12

5、0min內(nèi)測(cè)得的吸光度值穩(wěn)定，加樣回收率為101.70％，RSD值為2.59％(n=5)，該方法精密度和穩(wěn)定性較好，可用于缺乏匙羹藤酸對(duì)照品時(shí)匙羹藤總皂甙的含量測(cè)定。 3、對(duì)樹脂吸附法分離純化匙羹藤總皂甙進(jìn)行了研究?？疾炝薉101、NKA和AB-8三種樹脂對(duì)匙羹藤總皂甙的平衡吸附量，發(fā)現(xiàn)樹脂D101的吸附效果最好，其吸附量為93.90mg/g；對(duì)其靜態(tài)吸附進(jìn)行考察，得到了吸附等溫線和吸附動(dòng)力學(xué)曲線，對(duì)吸附等溫線進(jìn)行了線性擬合，結(jié)

6、果表明Langmuir方程能很好的描述D101樹脂的吸附行為，吸附動(dòng)力學(xué)曲線和吸附速率曲線表明，吸附8h左右達(dá)到平衡，且在2.5h以后吸附速率逐漸平穩(wěn)；對(duì)洗脫劑進(jìn)行考察，發(fā)現(xiàn)50％乙醇的洗脫效果較好；考察了動(dòng)態(tài)吸附過(guò)程中流速和進(jìn)樣濃度對(duì)D101樹脂吸附量的影響，結(jié)果表明進(jìn)樣濃度為7.73 mg／mL、流速為1.5mL／min時(shí)較適宜，因此，D101樹脂吸附分離純化匙羹藤總皂甙的最佳分離條件為進(jìn)樣濃度7.73mg／mL、流速1.5mL／m

7、in、洗脫劑50％乙醇。 匙羹藤總皂甙粗提物經(jīng)D101樹脂吸附分離純化后，匙羹藤總皂甙純度由純化前的19.05％提高到56.10％，得率為83.83％。 4、對(duì)匙羹藤總皂甙-β-環(huán)糊精包合物的制備進(jìn)行了研究。采用飽和水溶液法制備匙羹藤總皂甙-β-環(huán)糊精包合物，單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)結(jié)果均表明，最佳包合條件為β-CD與匙羹藤總皂甙投料比1∶1、包合溫度50℃、包合時(shí)間3h；匙羹藤總皂甙、β-環(huán)糊精和包合物的掃描電鏡考察表明

8、，包合物為細(xì)棒狀晶體，與匙羹藤總皂甙和β-環(huán)糊精均有明顯區(qū)別；對(duì)β-CD、匙羹藤總皂甙、β-CD與匙羹藤總皂甙混合物和匙羹藤總皂甙-β-CD包合物的紅外光譜分析，形成的包合物與匙羹藤總皂甙圖譜相比，吸收強(qiáng)度減弱；X射線衍射分析結(jié)果表明，包合物的衍射峰明顯少于混合物，且出現(xiàn)了新的晶面間距值，證明了匙羹藤總皂甙-β-CD包合物的形成；穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，包合物穩(wěn)定性良好，可克服易吸潮和有苦味等不足。飽和水溶液法制備匙羹藤總皂甙-β-環(huán)糊精包