DACH1在結(jié)直腸癌中的表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其在TGF-β和Wnt信號(hào)通路中的作用.pdf

1、軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院解放軍總醫(yī)院碩士學(xué)位論文DACH1在結(jié)直腸癌中的表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其在TGFβ和Wnt信號(hào)通路中的作用姓名：閆文姬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：消化內(nèi)科指導(dǎo)教師：楊云生；郭明洲20120511軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院碩士學(xué)位論文胞凋亡和細(xì)胞周期檢測(cè)及體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)探討DACHl對(duì)結(jié)直腸癌的作用。結(jié)果5株結(jié)腸癌細(xì)胞系中，HCTl16細(xì)胞系存在完全甲基化和表達(dá)缺失，經(jīng)去甲基化藥物5aza處理后DACHlmRNA水平恢復(fù)表達(dá)；其余4株細(xì)胞系均為非甲基化

2、且表達(dá)水平正常，5aza處理前后mRNA表達(dá)無變化。在100例結(jié)直腸癌組織中，DACHl甲基化率為48％(48／100)，在結(jié)腸息肉中為667％(1／15)，而在正常胃黏膜中無甲基化改變0％(0／8例)。結(jié)果表明DACHl甲基化與結(jié)腸癌腫瘤分級(jí)、分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(pO05)。雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)結(jié)果顯示DACHl高表達(dá)能夠抑制TGFB和wn信號(hào)通路的活性。恢復(fù)HCTll6中DACHl的表達(dá)可抑制克隆形成和細(xì)胞增殖。流式細(xì)胞分析

3、顯示G2／M期細(xì)胞增加，而對(duì)細(xì)胞凋亡無影響。WesternBlot結(jié)果顯示DACHl下調(diào)CyclinDl、cmyc和cdc2等下游蛋白的表達(dá)。DACHl能明顯抑制裸鼠內(nèi)HCTl16細(xì)胞的成瘤能力。結(jié)論DACHl啟動(dòng)子區(qū)甲基化是結(jié)直腸癌的頻發(fā)事件，并且調(diào)控DACHl的表達(dá)；DACHl甲基化與結(jié)腸癌腫瘤分級(jí)、分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。DACHl啟動(dòng)子區(qū)甲基化促進(jìn)細(xì)胞周期和結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖。啟動(dòng)子區(qū)域高甲基化導(dǎo)致的DACHl的表達(dá)缺失參與TT