矮牽牛STMADS11和FLC亞家族基因克隆及功能分析.pdf

1、矮牽牛(Petunia hybrida)是茄科矮牽牛屬花卉，多年生常做一年生栽培，被廣泛用于城市園林綠化，同時又是分子生物學研究的模式植物之一。MADS-box基因廣泛存在于植物中，其編碼的轉(zhuǎn)錄因子在植物生長發(fā)育的各個階段發(fā)揮重要作用。目前，矮牽牛中MADS-box基因家族的研究主要集中在ABCDE類基因，其它大部分亞家族基因功能尚不明確。STMADS11和FLC類基因是MADS-box家族的兩個亞家族，其中STMADS11亞家族主要與

2、營養(yǎng)生長和開花時間調(diào)控有關(guān)，而FLC亞家族主要與春化作用有關(guān)，但在除擬南芥等模式植物以外的大多數(shù)物種中其功能仍然不清晰。
　　本課題主要研究矮牽牛STMADS11和FLC亞家族基因的功能，通過克隆STMADS11亞家族的FBP13、FBP25和FLC亞家族的PMADS6、PMADS15、PMADS17，分別構(gòu)建超表載體和RNAi載體，轉(zhuǎn)化矮牽牛，獲得轉(zhuǎn)基因植物并進行表型觀測，從而鑒定基因功能。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)從

3、矮牽牛全基因組數(shù)據(jù)庫中獲取基因序列信息，設計特異引物，以野生型矮牽牛W115 cDNA為模板，擴增FBP13、FBP25、PMADS6、PMADS15、PMADS17基因，并構(gòu)建超表載體和干涉載體。
　　(2)構(gòu)建FBP13、FBP25、PMADS6、PMADS15、PMADS17五個基因的超表載體和干涉載體，轉(zhuǎn)化矮牽牛W115，獲得轉(zhuǎn)化苗，其中各個載體的轉(zhuǎn)化苗數(shù)量如下:PMADS6、PMADS15、PMADS17、FBP13、F