肺泡形成基因P311在高氧肺損傷中作用的研究.pdf

1、第一部分肺泡形成基因P311在高氧所致支氣管肺發(fā)育不良小鼠肺組織中的表達及意義
　　目的：探討肺泡形成基因P311在高氧所致支氣管肺發(fā)育不良小鼠肺組織中的表達及意義。
　　方法：將64只（生后4日齡）新生昆明（KM）小鼠隨機分為空氣組（對照組）和高氧組（實驗組），每組32只，分別交由母鼠喂養(yǎng)，每只母鼠帶8~10只新生鼠，空氣組置于室內(nèi)常壓空氣中喂養(yǎng)，高氧組置于同一室內(nèi)密閉氧艙中持續(xù)吸入氧濃度>90％的醫(yī)用氧氣，空氣組及高氧組

2、分別在喂養(yǎng)第1天、3天、7天、14天后取其肺組織（每組8只），通過蘇木精－伊紅染色（Hematoxylin-eosin staining）觀察肺組織病理變化并鑒定造模是否成功；進一步通過免疫組織化學染色和實時定量聚合酶鏈反應法（Real-Time PCR）檢測P311表達部位和基因；酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測P311蛋白。
　　結(jié)果：肺組織病理變化顯示：高氧組與空氣組比較，隨著吸入高濃度氧氣時間的延長，肺組織表現(xiàn)為肺泡數(shù)

3、目減少、體積增大、肺泡結(jié)構(gòu)簡單化。免疫組織化學染色后P311主要分布在肺泡壁及肺泡隔膜生長點的肺組織中，在空氣組小鼠肺組織中呈弱陽性反應，而在高氧組小鼠肺組織中呈強陽性反應。新生小鼠P311基因及蛋白表達在吸入高濃度氧氣第7天時達高峰；與空氣組比較，高氧組P311基因及蛋白表達增高（P<0.05）；
　　結(jié)論：長時間吸入高濃度氧氣可導致小鼠肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡簡單化，證明成功構(gòu)建高氧所致支氣管肺發(fā)育不良的動物模型。P311基因表達及

4、蛋白含量在高氧組均高于空氣組,證實P311可促進肺泡發(fā)育，可能是促進肺損傷修復的新的調(diào)控因子。
　　第二部分肺泡形成基因P311在高氧所致肺損傷小鼠肺組織中的作用研究
　　目的：了解肺泡形成基因P311在高氧暴露所致肺損傷小鼠肺組織中可能的作用；
　　方法：將64只（60日齡）成年昆明（KM）小鼠隨機分為空氣組和高氧組，空氣組置于室內(nèi)常壓空氣中飼養(yǎng)，高氧組暴露于同一室內(nèi)密閉的氧艙中，持續(xù)吸入氧濃度>90%的醫(yī)用氧氣，空

5、氣組及氧氣組分別喂養(yǎng)第1天、3天、7天、14天后取其肺組織（每組8只），蘇木精－伊紅染色（Hematoxylin-eosin staining）觀察肺組織病理變化并鑒定造模是否成功；免疫組織化學染色和實時定量聚合酶鏈反應法（Real-Time PCR）檢測P311表達和基因；酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測P311蛋白；
　　結(jié)果：成年小鼠高氧組隨著吸入高濃度氧氣時間的延長，可見炎性細胞浸潤、肺泡充血、水腫、肺泡腔增大、肺間質(zhì)