臍血Th17相關(guān)細(xì)胞因子水平與嬰兒期感染性疾病的關(guān)系的相關(guān)性研究.pdf

1、研究目的：
　　 感染性疾病是兒童時(shí)期尤其是嬰兒期最常見(jiàn)的疾病，嚴(yán)重者危及患兒生命。低出生體重兒、早產(chǎn)兒、男嬰等患有該類疾病的風(fēng)險(xiǎn)較大，盡管存在這些危險(xiǎn)因素，然而有些兒童更頻繁地患有感染性疾病，因此推測(cè)嬰兒先天性免疫系統(tǒng)的發(fā)育狀態(tài)及其對(duì)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)發(fā)育的影響可能影響隨后感染性疾病的發(fā)生和發(fā)展。
　　 據(jù)我們所知，先天性免疫在新生兒期占主導(dǎo)地位，細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)在先天性免疫和適應(yīng)性免疫之間起重要的紐帶作用。
　　

2、 Th17細(xì)胞是新近研究發(fā)現(xiàn)的一群主要分泌IL-17的輔助性T細(xì)胞，研究發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞是一群重要的介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的細(xì)胞，其分泌的細(xì)胞因子在炎癥、自身免疫性疾病、腫瘤等疾病的發(fā)病過(guò)程中起了重要作用。近年來(lái)研究證明IL-17等Th17相關(guān)細(xì)胞因子參與適應(yīng)性抗感染免疫反應(yīng)的過(guò)程，而關(guān)于Th17相關(guān)細(xì)胞因子在先天性免疫中的地位及其對(duì)適應(yīng)性免疫發(fā)育的影響機(jī)制尚不清楚。
　　 迄今為止，我們對(duì)于出生時(shí)Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平與嬰兒期感染性疾

3、病的關(guān)系知之甚少。本研究的目的是通過(guò)檢測(cè)新生兒臍帶血單個(gè)核細(xì)胞(CBMC)分泌的Th17相關(guān)細(xì)胞因子(IL-17、IL-23)水平與嬰兒期感染性疾病的關(guān)系，探討Th17相關(guān)細(xì)胞因子在早期感染免疫中的地位及其作用機(jī)制，以期發(fā)現(xiàn)能夠預(yù)測(cè)機(jī)體早期免疫功能的客觀指標(biāo)，為臨床預(yù)防及治療兒童感染性疾病提供更加有益的思路。
　　 研究方法：
　　 1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象選擇標(biāo)準(zhǔn):正常足月新生兒174例，母親妊娠期身體健康，分娩前未使用過(guò)藥物，生

4、后母乳喂養(yǎng)為主。
　　 2.標(biāo)本的采集及處理:新生兒出生斷臍后即刻取母體端臍靜脈血（4℃冰箱保存），加入淋巴細(xì)胞分離液，利用密度梯度離心法對(duì)CBMC進(jìn)行分離并制備細(xì)胞懸液，然后加入PHA(10μg/ml)對(duì)CBMC進(jìn)行刺激，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育。72小時(shí)后離心并收集上清液置于-80℃冰箱保存。
　　 3.血清學(xué)檢查:應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)直接定量測(cè)定CBMC培養(yǎng)上清液中IL-17、IL-23、IF

5、N-γ的含量。
　　 4.隨訪:隨訪記錄174例新生兒生后1年內(nèi)患有呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)感染性疾病的次數(shù)。感染性疾病的臨床診斷依據(jù)參照諸福棠主編的實(shí)用兒科學(xué)（第七版）、沈曉明主編的兒科學(xué)（第七版）。根據(jù)感染次數(shù)將研究對(duì)象進(jìn)行分組，0組即嬰兒期患有感染性疾病的總頻率為0，1組即嬰兒期患有感染性疾病的總頻率為1，以此類推;在對(duì)各系統(tǒng)感染性疾病次數(shù)進(jìn)行分組時(shí)，0組代表嬰兒期患有該系統(tǒng)感染性疾病的頻率為0，1組代表嬰兒期患有該系

6、統(tǒng)感染性疾病的頻率為1，以此類推。
　　 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)所得資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以x±s表示。應(yīng)用單因素方差分析、多元線性回歸分析法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.4組與5組間IL-17A水平無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，其余各組間IL-17A水平均存在顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2.1組與2組之間、4組與5組之間IL-

7、23水平無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，其余各組間IL-23水平均存在顯著性差異(P＜0.05)。
　　 3.0、1、2、3組之間、3組與4組之間、4組與5組之間IFN-γ水平無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，其余各組間IFN-γ水平均存在顯著性差異(P＜0.05)。
　　 4.三種細(xì)胞因子與嬰兒期感染性疾病的次數(shù)存在相關(guān)性(P＜0.05)，其中IFN-γ與感染性疾病次數(shù)的相關(guān)性最強(qiáng)(Pearson相關(guān)系數(shù)=-0.571)，其

8、次為IL-17A(Pearson相關(guān)系數(shù)=-0.430)，IL-23與感染性疾病次數(shù)的相關(guān)性最弱(Pearson相關(guān)系數(shù)=-0.240)。
　　 5.IFN-γ、IL-17A與嬰兒期呼吸系統(tǒng)感染的次數(shù)存在明顯的負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，IL-23與嬰兒期呼吸系統(tǒng)感染的次數(shù)無(wú)明顯的相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 6.IFN-γ、IL-23與嬰兒期消化系統(tǒng)感染的次數(shù)存在負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，IL-17A與嬰兒期消化系統(tǒng)感染的

9、次數(shù)無(wú)明顯的相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 7.三種細(xì)胞因子與嬰兒期泌尿系統(tǒng)感染的次數(shù)無(wú)明顯的相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.臍血IL-17A、IL-23、IFN-γ水平與生后1年內(nèi)發(fā)生感染性疾病的次數(shù)負(fù)相關(guān)，提示IL-17A、IL-23和IFN-γ均參與了機(jī)體的抗感染免疫應(yīng)答。
　　 2.Th17相關(guān)細(xì)胞因子可能通過(guò)影響先天性免疫系統(tǒng)狀態(tài)及后天性免疫系統(tǒng)發(fā)育而影響感染性疾病的發(fā)生與發(fā)展