缺氧誘導心肌細胞凋亡中BcL-2、Bax和NF-k B的表達及雌激素的作用.pdf

1、[目的]探討缺氧誘導心肌細胞凋亡中Bcl-2、Bax和NF-kB的表達，以及17β-雌二醇(E2)對缺氧心肌細胞的保護作用。
　　 [方法]Sprague-Dawley大鼠乳鼠(出生1-2d)心肌細胞原代培養(yǎng)，待細胞生長良好時進行藥物干預和缺氧刺激。將細胞分成四組，分別為C1（對照組）、C2（單純加藥組）、H1（單純缺氧組）和H2（加藥缺氧組）。即C2、H2經(jīng)E2作用24h，之后H1、H2缺氧(5％CO2+95%N2)處理12h

2、，再進行統(tǒng)一處理。采用MTT法檢測缺氧對心肌細胞活力和抑制率的影響及E2對缺氧心肌細胞的保護作用。采用Flowcytometry方法檢測心肌細胞的凋亡。采用WesternBlot技術檢測Bcl-2、Bax和NF-κB的表達變化。采用Real-TimePCR技術分析Bcl-2mRNA和BaxmRNA水平的表達變化。
　　 [結果]缺氧使心肌細胞活力下降，且對心肌細胞生長產生抑制，10-8、1O-7mol/LE2可以提高心肌細胞活力

3、，逆轉缺氧對心肌細胞生長的抑制作用。缺氧加重心肌細胞凋亡，使心肌細胞Bax蛋白、BaxmRNA、NF-κB蛋白的表達升高，Bcl-2蛋白、Bcl-2mRNA的表達降低，而經(jīng)10-7mol/L17β-雌二醇預處理的缺氧心肌細胞較單純缺氧組心肌細胞Bax蛋白、BaxmRNA、NF-κB蛋白的表達降低，Bcl-2蛋白、Bcl-2mRNA表達升高。
　　 [結論]缺氧對心肌細胞生長具有一定的抑制作用，還促進心肌細胞的凋亡，且使Bcl-2