轉(zhuǎn)豬FSHR和KISS1基因小鼠繁殖性能分析.pdf

1、繁殖性能是家畜的重要經(jīng)濟(jì)性狀，繁殖力低是限制現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展的原因之一。卵泡刺激素受體(Follicle Stimulating Hormone Receptor, FSHR)和親吻素（KISS1）基因?qū)倚蟮漠a(chǎn)仔數(shù)有顯著影響。卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH)在促進(jìn)和維持性腺發(fā)育和生殖功能中發(fā)揮重要作用，但是其生理作用需通過分布于細(xì)胞膜表面的卵泡刺激素受體(Follicle stimulati

2、ng hormone receptor，F(xiàn)SHR)介導(dǎo)。KISS1基因在下丘腦-垂體-性腺軸系統(tǒng)中起到中樞節(jié)點(diǎn)作用。KISS1基因的翻譯產(chǎn)物kisspeptins刺激GnRH分泌，激活性腺軸，影響黃體生成素(Luteinizing hormone，LH)和FSH的分泌，進(jìn)而對哺乳動物生殖內(nèi)分泌起調(diào)控作用。KISS1及其受體G蛋白偶聯(lián)受體（G protein-coupled receptor54，GPR54）基因還是調(diào)節(jié)動物初情期的關(guān)鍵基

3、因。
　　實(shí)驗(yàn)室前期通過分別構(gòu)建小鼠卵巢顆粒細(xì)胞特異表達(dá)的豬FSHR基因（pFSHR）真核載體AMH-pFSHR和小鼠腦部特異表達(dá)豬KISS1基因（pKISS1）的真核載體pCaMKⅡα-KISS1，通過顯微注射的方法制備了轉(zhuǎn)豬FSHR和KISS1基因小鼠。本文針對F1-F5代小鼠陽性率、pFSHR和pKISS1基因在小鼠體內(nèi)的表達(dá)情況、以及對雌性小鼠繁殖性能的影響進(jìn)行研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.轉(zhuǎn)豬FSHR基因小鼠:F1

4、-F5代轉(zhuǎn)基因小鼠平均每窩產(chǎn)仔數(shù)均高于野生型小鼠，F(xiàn)1和F3代的窩產(chǎn)仔數(shù)達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。pFSHR mRNA在轉(zhuǎn)基因小鼠卵巢中特異表達(dá)，心臟、肝臟、脾臟、腎臟、子宮及下丘腦中則未檢測到其表達(dá)，而在轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠的卵巢都有mFSHR mRNA的表達(dá)。豬FSHR蛋白在轉(zhuǎn)基因小鼠卵巢中有表達(dá)，其表達(dá)水平在陽性小鼠之間沒有顯著差異，與mRNA水平結(jié)果一致。FSH、LH、雌二醇、孕酮在間情期轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠中沒有顯著差

5、異(P＞0.05)。產(chǎn)仔數(shù)曲線表明轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠的窩產(chǎn)仔數(shù)隨著年齡增加先升高，再降低;在同一鼠齡，轉(zhuǎn)基因小鼠的產(chǎn)仔數(shù)比野生型小鼠多，且都在220日齡左右具有最大的窩產(chǎn)仔數(shù)，且達(dá)到顯著水平(P＜0.05);轉(zhuǎn)基因小鼠的生產(chǎn)間隔時(shí)間比野生型小鼠更短(P＜0.05)。
　　2.轉(zhuǎn)豬KISS1基因小鼠: F1-F5代轉(zhuǎn)基因小鼠平均每窩產(chǎn)仔數(shù)均高于野生型小鼠，而且F1和F2代的窩產(chǎn)仔數(shù)達(dá)到顯著水平（分別為P＜0.01和P＜0.05）

6、。pKISS1 mRNA在轉(zhuǎn)基因小鼠下丘腦中有表達(dá)，其他組織中則未檢測到其表達(dá);在轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠的卵巢和下丘腦中都能檢測到mKISS1 mRNA的表達(dá)。豬kisspeptin蛋白在轉(zhuǎn)基因小鼠下丘腦中有表達(dá)。F4代轉(zhuǎn)基因小鼠血清中FSH和雌二醇激素濃度顯著高于野生型小鼠(P＜0.05)。產(chǎn)仔數(shù)曲線表明:同一鼠齡轉(zhuǎn)基因小鼠比野生型小鼠具有更多的產(chǎn)仔數(shù)，都在200日齡左右具有最大的窩產(chǎn)仔數(shù)，且生產(chǎn)間隔時(shí)間比野生型小鼠更短。F4代轉(zhuǎn)豬K