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1、目的:擬開(kāi)發(fā)一種能有效治療蜜蜂常見(jiàn)感染性疾病的純中藥合劑,從而解決目前在生產(chǎn)蜂產(chǎn)品的過(guò)程中濫用化學(xué)藥物造成的藥物殘留問(wèn)題,以及隨之而來(lái)的食品安全、出口受限、環(huán)境毒害等問(wèn)題;初步探討把蜜蜂作為一種新的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的可行性,建立一種蜜蜂快速衰老動(dòng)物模型。 方法:通過(guò)制備工藝優(yōu)選,確定合劑的制備工藝;用薄層色譜法檢識(shí)蜂病康合劑中的靛玉紅和黃芩苷,并用HPLC法測(cè)定合劑中黃芩苷的含量,以便確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)蜂病康合劑對(duì)正常意大利蜜蜂常壓耐缺
2、氧、耐高溫、耐低溫能力的研究,觀察此藥物提高蜜蜂耐受不良環(huán)境的能力。通過(guò)適當(dāng)高溫、缺氧結(jié)合震動(dòng)環(huán)境,建立蜜蜂快速衰老動(dòng)物模型,并通過(guò)觀察蜜蜂的外觀變化及測(cè)量蜜蜂整體勻漿中總SOD活力和GSH-PX活力的變化情況,結(jié)合病理切片確定合適的造模時(shí)間。根據(jù)上述造模方法的篩選進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn):預(yù)先給藥7天后,分別給蜂病康合劑大、小劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組、空白對(duì)照組、模型對(duì)照組的蜜蜂進(jìn)行造模,之后分別測(cè)定其整體勻漿中的SOD、MDA、GSH-PX,進(jìn)行統(tǒng)
3、計(jì)分析,并觀察各組蜜蜂腸、腦的組織病理切片,分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 結(jié)果:通過(guò)藥學(xué)研究,我們已經(jīng)成功制備出一種合劑劑型,確定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),已經(jīng)試生產(chǎn)出了少量樣品。通過(guò)蜂病康合劑對(duì)正常意大利蜜蜂常壓耐缺氧、耐高溫、耐低溫能力的研究,發(fā)現(xiàn)蜂病康合劑使用后能夠明顯增加蜜蜂在常壓缺氧環(huán)境中的耐受時(shí)間、提高在高溫和低溫環(huán)境中的耐受能力,并能減少凍僵后復(fù)蘇時(shí)間。通過(guò)建立蜜蜂快速衰老模型,并對(duì)造模時(shí)間進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)在造模進(jìn)行四小時(shí)后,蜜蜂體內(nèi)的SOD、
4、GSH-PX與正常組比較下降明顯,病理組織學(xué)觀察也顯示隨著造模時(shí)間的增加,蜜蜂腦組織和腸組織變性加重,說(shuō)明造模成功。藥效實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)給予大、小劑量的合劑均能明顯升高蜜蜂體內(nèi)的SOD活力,大劑量能明顯升高蜜蜂體內(nèi)的GSH-PX活力。病理學(xué)觀察也顯示給藥組能不同程度的對(duì)抗腦組織細(xì)胞和腸組織細(xì)胞的這種變性。 結(jié)論:蜂病康合劑的制備工藝合理,可以進(jìn)行試生產(chǎn),并進(jìn)一步開(kāi)發(fā);此藥給正常蜜蜂飼喂后能夠顯著提高其對(duì)抗不良生活環(huán)境的能力,提高對(duì)不良
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