從PI3K-Akt-P53信號(hào)傳導(dǎo)通路探討蛇葡萄素抗胃癌作用的機(jī)制研究.pdf

1、目的：從PI3K/Akt/P53信號(hào)傳導(dǎo)通路探討蛇葡萄素抗胃癌的作用機(jī)制。
　　方法：（1）蛇葡萄素對(duì)人胃癌細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，設(shè)空白對(duì)照組、順鉑陽(yáng)性對(duì)照組和蛇葡萄素組，以人胃癌 SGC-7901細(xì)胞為研究對(duì)象，采用MTT法評(píng)價(jià)蛇葡萄素體外對(duì)腫瘤細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響及倒臵顯微鏡下觀察各組細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。（2）蛇葡萄素對(duì) SGC-7901細(xì)胞 PI3K/Akt/P53信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，設(shè)空白對(duì)照

2、組和蛇葡萄素低、中、高劑量組（10.0μg/ml、20.0μg/ml、40.0μg/ml），藥物作用48 h后，采用 Western blot技術(shù)檢測(cè)蛇葡萄素對(duì) SGC-7901細(xì)胞 PI3K/Akt/P53信號(hào)傳導(dǎo)通路凋亡相關(guān)蛋白PI3K、Akt、P53、P21、Bcl-2、Bax表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：（1）蛇葡萄素對(duì)人胃癌細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響。MTT法結(jié)果表明，蛇葡萄素19.7μg/ml、29.6μg/ml、44.4μg/ml

3、、66.6μg/ml、100.0μg/ml對(duì)SGC-7901細(xì)胞的增殖有抑制作用，與空白組比較差異有顯著性（P<0.05~0.01），且呈劑量依賴關(guān)系，其IC50為40.79μg/ml；倒臵顯微鏡觀察可見(jiàn)，蛇葡萄素組與空白組比較，8.8μg/ml、13.2μg/ml濃度組細(xì)胞數(shù)目、形態(tài)改變不明顯，19.7μg/ml、29.6μg/ml、44.4μg/ml、66.6μg/ml、100.0μg/ml濃度組細(xì)胞數(shù)目隨著劑量的增加逐漸減少，形態(tài)

4、改變明顯，細(xì)胞體積變小、皺縮、破裂。（2）蛇葡萄素對(duì)SGC-7901細(xì)胞 PI3K/Akt/P53信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響。10.0μg/ml、20.0μg/ml、40.0μg/ml濃度的蛇葡萄素作用于SGC-7901細(xì)胞48h后，對(duì)PI3K、Akt蛋白的表達(dá)無(wú)明顯影響，與空白對(duì)照組比較差異均沒(méi)有顯著性（P>0.05），其對(duì)PI3K的相對(duì)蛋白表達(dá)量分別為0.15±0.02、0.12±0.03、0.19±0.09，對(duì) Akt的相對(duì)蛋白表達(dá)量分別

5、為1.65±0.41、1.40±0.23、1.07±0.35。20.0μg/ml、40.0μg/ml濃度的蛇葡萄素作用于 SGC-7901細(xì)胞48h后，均可上調(diào)P53、P21蛋白的表達(dá)，與空白對(duì)照組比較差異有顯著性（P<0.05），其對(duì)P53的相對(duì)蛋白表達(dá)量分別為2.97±0.34、3.13±0.64，對(duì)P21的相對(duì)蛋白表達(dá)量分別為0.36±0.06、0.34±0.05；而40.0μg/ml可上調(diào)Bax、下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)，與空白