2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察體外培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞在高糖條件下細(xì)胞活性、活性氧(ROS)和線粒體膜電位(MMP)的變化，研究左卡尼汀(L-carnitine，LC)對其作用的影響，探討LC對Müller細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　 方法:取出生1-3天SD大鼠視網(wǎng)膜，反復(fù)胰酶消化法純化Müller細(xì)胞，進(jìn)行GS、GFAP單標(biāo)及雙標(biāo)免疫熒光鑒定。用臺盼藍(lán)染色法觀察不同濃度葡萄糖對Müller細(xì)胞生長狀態(tài)及存活率的影響，確立高糖濃度。將M

2、üller細(xì)胞隨機(jī)分為正常對照組、高糖組和不同濃度LC處理組，LC處理組在高糖培養(yǎng)液中分別加入終濃度為50、100、200umol/L LC。MTT法檢測細(xì)胞活性，Hoechst33342染核檢測細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)ROS和MMP的變化。
　　 結(jié)果:免疫熒光顯示，體外培養(yǎng)的細(xì)胞大部分抗GS、GFAP抗體反應(yīng)陽性，該方法培養(yǎng)的Müller細(xì)胞純度可達(dá)90％以上。MTT結(jié)果顯示，高糖培養(yǎng)組細(xì)胞活性顯著下降（P＜0.05）

3、，LC處理后細(xì)胞活性上調(diào)，以100umol/L LC作用最佳。ROS檢測結(jié)果顯示，高糖損傷后細(xì)胞內(nèi)ROS水平明顯高于正常對照組（P＜0.05），Lc處理后，ROS值均低于高糖培養(yǎng)組(P＜0.05)。MMP檢測結(jié)果顯示，高糖損傷12h后，細(xì)胞MMP較正常對照組顯著下降(P＜0.05)，Lc處理后，MMP均高于高糖培養(yǎng)組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:改進(jìn)的酶消化法是一種簡便有效的純化培養(yǎng)視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的方法;高糖條件下視網(wǎng)

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