RPA70表達(dá)在食管癌細(xì)胞輻射抗性中的意義.pdf

1、目的：構(gòu)建人食管癌細(xì)胞株TE-1輻射抗性模型，觀察RPA70基因在輻射抗性模型中的表達(dá)，探討RPA70表達(dá)與食管癌輻射抗性之間的關(guān)系，為以RPA70為靶點的分子靶向放療增敏提供體外研究的理論及實驗依據(jù)。
　　方法：①大劑量lOGy照射食管癌細(xì)胞株TE-1連續(xù)傳代，建立食管癌細(xì)胞輻射抗性模型TE-1R，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化②設(shè)對照組TE-1(未照射)、實驗組TE-1R(照射后)分別給予6 MVX射線單次照射0、1、2、4、

2、6、8 Gy，多靶單擊模型擬合細(xì)胞存活曲線，成克隆實驗驗證兩組細(xì)胞的放射敏感性差異。③采用Western blot法檢測對照射與實驗組兩組細(xì)胞株中RPA70蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：①成功構(gòu)建了TE-1R輻射抗性模型細(xì)胞株，細(xì)胞集落形成數(shù)隨照射劑量升高而降低，其差異具有顯著性(P<0.01)。成克隆實驗顯示：對照組細(xì)胞D0=2.05、SF2=0.63，實驗組細(xì)胞D0=2.80，SF2=0.78，兩組SF2比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義(t=

3、-9.83，P<0.05)②Western blot結(jié)果顯示：對照組RPA70蛋白表達(dá)較弱(0.27±0.04)，實驗組RPA70蛋白表達(dá)較對照組升高(1.22±0.06)，與對照組相比RPA70蛋白表達(dá)增加4.5倍，統(tǒng)計學(xué)有顯著性差異(P<0.01)。
　　結(jié)論：1.成功構(gòu)建食管癌輻射抗性模型，新構(gòu)建的細(xì)胞系TE-1R比其親本細(xì)胞TE-1更具輻射抗拒性；2.電離輻射能夠誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞RPA70蛋白表達(dá)增高，可能與照射后引起的DN