歐洲細(xì)管蔥葉枯病的病原學(xué)研究.pdf

1、歐洲細(xì)管蔥是湖北五峰新橋科技有限公司從德國引進(jìn)的一種食用蔥，其凍干產(chǎn)品主要出口歐洲。該蔥在五峰規(guī)?；N植后，普遍出現(xiàn)葉枯癥狀，嚴(yán)重影響其產(chǎn)量和品質(zhì)。目前對該病的病原學(xué)及防治尚無系統(tǒng)研究報(bào)道。本文在對病害癥狀進(jìn)行了一般觀察的基礎(chǔ)上，研究了病原菌的培養(yǎng)性狀及相關(guān)生物學(xué)特性，并進(jìn)行了分子鑒定，同時(shí)，測定了幾種化學(xué)藥劑對病原菌的室內(nèi)毒力效果，對篩選的幾種內(nèi)生拮抗細(xì)菌進(jìn)行了初步研究。主要結(jié)果如下： 1.確定了病原菌的分類地位：從病植株上分

2、離得到的菌株Alternariasp.，用菌絲塊接種歐洲細(xì)管蔥葉片進(jìn)行致病性測定，證實(shí)Alternariasp.為致病菌。該菌在PDA培養(yǎng)基上，菌落平展、圓形、淺褐色至暗褐色，菌絲密絨狀，灰白色，菌落邊緣整齊，中心部位淡灰色至黑色，外圍灰白色。分生孢子梗暗色，單生或叢生，直或略彎曲，偶有分枝，具4～7個(gè)隔膜，大小3.83～5.1μm×5.1～22.95μm，分生孢子梗頂端膨大，頂生分生孢子。分生孢子單生或鏈生，孢子大小10.2～45.9

3、μm×7.65～21.85μm，倒棍棒形或橢圓形，灰色或暗黃褐色，表面光滑或具疣狀突起，多有喙，成熟孢子具有橫隔膜3～7個(gè)，縱隔膜0～3個(gè)，隔膜處略縊縮，表面密布疣狀細(xì)點(diǎn)。rDNA-ITS測序結(jié)果與GeneBank中的序列進(jìn)行同源性比較發(fā)現(xiàn)該菌株與Alternariaalternata的同源性高達(dá)99％。根據(jù)形態(tài)學(xué)特征和分子鑒定結(jié)果，確認(rèn)該病原菌為Alternariaalternata。 2.明確了病原菌相關(guān)生物學(xué)特性：在有無光

4、照或連續(xù)光照的條件下病菌均可生長和產(chǎn)孢，光暗交替最有利于菌絲的生長，黑暗條件下促進(jìn)病菌產(chǎn)孢。病菌生長發(fā)育的最適溫度為25～30℃。pH2.0～12.0均能生長，最適pH6.0～9.0。該菌在以蔗糖和淀粉為碳源的培養(yǎng)基中菌落生長最快，其次為和乳糖；較適宜生長的氮源為氯化鈣，對尿素和甘氨酸也能充分利用。試驗(yàn)證明55℃的溫水處理10min.可殺死菌絲體、抑制孢子萌發(fā)。 3.測定了幾種化學(xué)藥劑的抑菌防病效果：不同化學(xué)藥劑對病菌室內(nèi)毒力效

5、果測定表明菌克星、稀酰嗎啉、多寶對該菌生長具有明顯抑制作用，有效中濃度(EC50)分別為5.19mg/L、18.39mg/L、88.87mg/L，以菌克星的抑菌效果最好；50％氯溴異氰尿酸抑制效果最差，供試的10種藥劑測定濃度與抑菌作用均呈正相關(guān)。10種藥劑田間防效結(jié)果表明：10天后稀酰嗎啉、百菌清和菌克星有較好防效，其中菌克星田間防效達(dá)73.1％，可以應(yīng)用于大田試驗(yàn)，建議田間以500-800倍稀釋噴霧。 4.篩選鑒定了內(nèi)生拮抗

6、細(xì)菌：通過對歐洲細(xì)管蔥體內(nèi)內(nèi)生細(xì)菌的分離，得到了7株內(nèi)生細(xì)菌菌株，進(jìn)一步通過平板對峙培養(yǎng)，篩選出內(nèi)生細(xì)菌wf-A7菌株對歐洲細(xì)管蔥葉枯病菌具有明顯的抑菌作用；生防菌株wf-A7生物學(xué)特性研究表明：該生防菌最適宜的溫度為30℃，最適宜的PH值為6.5，最適宜生長的碳源為淀粉，最適宜生長的氮源為蛋白胨。通過16SrDNA分子鑒定，將序列與基因庫(genebank)中比對，結(jié)果表明該生防菌與Burkholderiacepacia菌株的同源性為