西瓜根腐病病原學(xué)研究及防治方法的初探.pdf

1、西瓜根腐病是由半知菌亞門真菌引起的病害，近年來逐漸成為我國西瓜產(chǎn)區(qū)的主要病害之一，據(jù)報道自根西瓜和嫁接西瓜都可以感病，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。嫁接技術(shù)是防治西瓜根部病害發(fā)生的有效手段，目前我國嫁接西瓜的普及率達(dá)到了40％，但是生產(chǎn)上發(fā)現(xiàn)嫁接后的西瓜仍會發(fā)生根腐病，且有逐年加重的趨勢。目前相關(guān)的研究比較少，關(guān)于西瓜根腐病病原學(xué)及防治方法的系統(tǒng)研究還是空白。本試驗(yàn)通過對西瓜根腐病菌的分離和鑒定，生物學(xué)特性，侵染途徑和防治方法的研究，旨在弄清西

2、瓜根腐病的致病菌及其生物學(xué)特性、探究西瓜根腐病菌的侵染途徑并提出科學(xué)合理的防治方法，具體研究結(jié)果如下:
　　1.采用常規(guī)組織分離及單孢純化的方法共獲得了53個分離物，通過形態(tài)學(xué)觀察，參照Nelson鐮刀菌分類系統(tǒng)進(jìn)行鑒定，初步將分離物鑒定為茄病鐮刀菌(F.solani)、F.commune、串珠鐮刀菌（F.verticillioide）、層出鐮刀菌（F.proliferatum）。其中，F(xiàn).solani有23個、F.commune

3、有15個、F.verticillioide有8個、F.proliferatum有7個，分別占44.3％、28.5％、15.1％、13.2％。
　　2.采用孢子懸浮液蘸根接種法（106個/mL）對53個分離物進(jìn)行致病性驗(yàn)證，篩選出致病菌Fs-8。采用EF-1α基因序列分析對結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)Fs-8與F.solani(FN689821.1、FN689824.1、FN689827.1)相似率高達(dá)100％;采用MEGA5.0軟件以Ne

4、ighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，結(jié)果表明Fs-8與F.solani的親緣關(guān)系最近，位于進(jìn)化樹的同一支，與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果一致。
　　3.采用接種法和特異性引物對病原菌的專化型和生理小種進(jìn)行了鑒定，結(jié)果表明Fs-8對西瓜、南瓜、葫蘆幼苗和西瓜果實(shí)都具有致病性。采用茄病鐮刀菌瓜類?；?號生理小種特異性引物(Fsc1-EF1/Fsc1-EF2)進(jìn)行驗(yàn)證，可以獲得預(yù)期的特異性條帶(505bp)。最終將西瓜根腐病的病原菌鑒定為

5、茄病鐮刀菌瓜類?；?號生理小種（Fusariumsolanif.sp.cucurbitaerace1）。
　　4.采用PDA培養(yǎng)基和真菌生理培養(yǎng)基，分別研究了不同溫度、pH、碳源、氮源對Fs-8生長和產(chǎn)孢的影響，結(jié)果表明最適合該菌生長和產(chǎn)孢的溫度范圍是28℃～30℃;pH范圍是5～10;該菌可以利用多種碳源;在KNO3，Ca(NO3)2，NaNO3等硝態(tài)氮源培養(yǎng)基上生長的較好，在(NH4)2SO4，NH4Cl等銨態(tài)氮源上生長的最

6、較差。
　　5.采用組織化學(xué)染色的方法，研究了Fs-8侵染途徑。結(jié)果表明Fs-8通過傷口進(jìn)入西瓜根部以后，首先以菌絲在皮層薄壁細(xì)胞間隙緩慢擴(kuò)展，使細(xì)胞破潰;進(jìn)而在細(xì)胞破潰的部位產(chǎn)生厚垣孢子;接著厚垣孢子轉(zhuǎn)移到新的部位并萌發(fā)形成菌絲，繼續(xù)進(jìn)行侵染。
　　6.采用含毒介質(zhì)法，研究了甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅、苯醚·咪鮮胺、世高、綠亨一號、拿敵穩(wěn)7種化學(xué)藥劑對Fs-8生長的抑制作用。抑菌效果最好的是苯醚·咪鮮胺、拿敵穩(wěn)和多菌靈，