基于C-,o-T-1 DNA及rDNA的甘藍(lán)型油菜和甘藍(lán)的熒光原位雜交核型分析.pdf

1、為了探索一種高效可靠的蕓薹屬植物核型分析方法，以甘藍(lán)型油菜中油821、甘藍(lán)黑葉小平頭為材料，分別從其基因組DNA中分離出Cot-1DNA，用生物素標(biāo)記做探針，同時(shí)用地高辛標(biāo)記的rDNA做探針，對(duì)兩種材料有絲分裂中期相染色體分別做單色和雙色熒光原位雜交。 通過(guò)對(duì)甘藍(lán)型油菜中油821的單色熒光原位雜交，將Cot-1DNA雜交帶定位于第1，5，7，9和11號(hào)染色體長(zhǎng)臂，第4，6，8，10，12，15，17，18和19號(hào)染色體短臂，第2

2、，3，13，14，和16號(hào)染色體周著絲粒位置。 通過(guò)對(duì)甘藍(lán)黑葉小平頭的雙色熒光原位雜交，將Cot-1DNA雜交帶定位于第3和第9號(hào)染色體長(zhǎng)臂，第4，5，7和第8號(hào)染色體短臂，第1，2和第6號(hào)染色體周著絲粒位置；25SrDNA定位于第4和第7號(hào)染色體的短臂，其中第4號(hào)染色體上的熒光信號(hào)特別強(qiáng)；有1對(duì)染色體上檢測(cè)有5SrDNA基因座，雜交信號(hào)較弱。根據(jù)染色體長(zhǎng)度和著絲點(diǎn)位置，確定了甘藍(lán)黑葉小平頭的核型公式為2n=2x=18=18m+

3、2sm，核型為2B型。 Cot-1DNA在甘藍(lán)型油菜、甘藍(lán)黑葉小平頭的每一條染色體上都有特異性的熒光雜交帶，并且信號(hào)穩(wěn)定，同源染色體在相同的位置有Cot-1DNA熒光帶，而非同源染色體有不同的Cot-1DNA熒光帶型。在甘藍(lán)中，有25SrDNA的雜交信號(hào)的位點(diǎn)同時(shí)也有Cot-1DNA的雜交信號(hào)，證實(shí)了Cot-1DNA與25SrDNA二者具有一致性的染色體位置特征。 基于傳統(tǒng)的根據(jù)染色體長(zhǎng)度和臂比值的分析，以及Cot-1D