黏蛋白MUC1和MUC2在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其與淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、黏蛋白是一類由上皮細(xì)胞分泌的高分子量的糖蛋白，其基因的表達(dá)具有組織和細(xì)胞特異性，而蛋白表達(dá)的改變?cè)谀[瘤發(fā)生和細(xì)胞分化中起著重要作用。研究結(jié)直腸癌和區(qū)域淋巴結(jié)中黏蛋白MUC1和MUC2的表達(dá)對(duì)進(jìn)一步加深了解結(jié)直腸癌變的發(fā)生和發(fā)展，對(duì)準(zhǔn)確分期和判斷預(yù)后，制定個(gè)性化治療具有重要意義。 目的 1.探討?zhàn)さ鞍譓UC1和MUC2在結(jié)直腸癌及其淋巴結(jié)中的表達(dá)和臨床意義。 2.研究黏蛋白MUC1和MUC2的表達(dá)與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)微

2、轉(zhuǎn)移關(guān)系，以尋找一種可靠的指標(biāo)檢測(cè)結(jié)直腸癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移。 3.初步研究結(jié)直腸癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移對(duì)預(yù)后的影響。 方法 1.對(duì)53例結(jié)直腸癌標(biāo)本和30例結(jié)直腸癌的區(qū)域214枚淋巴結(jié)進(jìn)行研究，以免疫組化技術(shù)分別檢測(cè)結(jié)直腸癌組織和淋巴結(jié)中黏蛋白MUC1和MUC2的表達(dá)，并分析黏蛋白MUC1和MUC2的表達(dá)與結(jié)直腸癌不同臨床病理參數(shù)的關(guān)系，研究淋巴結(jié)中MUC1和MUC2的表達(dá)與Dukes分期關(guān)系。 2.對(duì)6例結(jié)直腸癌、

3、6枚有轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中和172枚無轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，應(yīng)用巢式逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(nestedRT-PCR)來分別檢測(cè)結(jié)直腸癌組織和區(qū)域淋巴結(jié)中MUC1mRNA和MUC2mRNA的表達(dá)，了解淋巴結(jié)中MUC1和MUC2的表達(dá)與Dukes分期關(guān)系，并比較IHC和nestedRT-PCR兩種方法在淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移上陽性檢出率。 3.對(duì)21例DukesA和B期結(jié)直腸癌患者術(shù)后收集臨床資料，進(jìn)行長(zhǎng)期隨訪和統(tǒng)計(jì)分析，比較預(yù)后。 結(jié)果 1

4、.免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：黏蛋白MUC1和MUC2在正常結(jié)直腸黏膜的陽性表達(dá)率分別是13.3％(2/15)和100％(15/15)，而在結(jié)直腸癌的陽性表達(dá)率分別是43.3％(13/30)和50.0％(15/30)。在轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的陽性表達(dá)率均為100％(42/42)，在無轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)陽性表達(dá)率分別為21.5％(37/172)和13.4％(23/172)，其中兩者在DukesA、B、C期的無轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的陽性表達(dá)率分別是5.4％(2/37)、21

5、.1％(23/109)、46.2％(12/26)和0％(0/37)、14.7％(16/109)、26.9％(7/26)。結(jié)直腸癌中黏蛋白MUC1的表達(dá)與腫瘤Dukes分期、浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P＜0.05)，與結(jié)直腸癌的分化程度呈負(fù)相關(guān)(P＞0.05)。黏蛋白MUC2的表達(dá)與腫瘤Dukes分期、浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P＜0.05)，未發(fā)現(xiàn)黏蛋白MUC2的表達(dá)與腫瘤的分化程度有關(guān)(P＞0.05)，結(jié)直腸黏液性癌中黏蛋白M

6、UC1的表達(dá)明顯高于非黏液性癌(P＜0.05)，而MUC2的表達(dá)明顯低于非黏液性癌(P＜0.05)，呈現(xiàn)明顯分離趨勢(shì)。黏蛋白MUC1和MUC2的陽性表達(dá)率和淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移率隨Dukes分期上升呈顯著遞增(P＜0.05)。檢測(cè)淋巴結(jié)中MUC1的表達(dá)，有7例患者因免疫組化存在微轉(zhuǎn)移而調(diào)整分期；檢測(cè)淋巴結(jié)中MUC2的表達(dá)，有4例患者因免疫組化證實(shí)存在微轉(zhuǎn)移而調(diào)整分期。聯(lián)合檢測(cè)淋巴結(jié)中MUC1和MUC2，共有8例患者免疫組化分期從DukesA或B

7、期上調(diào)到DukesC期。 2.nestedRT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：正常結(jié)直腸黏膜、結(jié)直腸癌和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)黏蛋白MUC1mRNA和MUC2mRNA陽性表達(dá)率均為100％(6/6)，非惡性結(jié)腸疾病淋巴結(jié)黏蛋白MUC1mRNA和MUC2mRNA陽性表達(dá)率均為0％(0/6)。無轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)黏蛋白MUC1mRNA和MUC2mRNA陽性表達(dá)率分別為39.5％(68/172)和37.8％(65/172)，其中兩者在DukesA、B、C期無轉(zhuǎn)移淋巴

8、結(jié)中的陽性表達(dá)率分別是5.4％(2/37)、43.1％(47/109)、73.1％(19/26)和5.4％(2/37)、42.2％(46/109)、65.4％(17/26)，黏蛋白MUC1和MUC2的陽性表達(dá)率和淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移率隨Dukes分期上升呈顯著遞增(P＜0.05)，淋巴結(jié)中MUC1mRNA和MUC2mRNA的陽性表達(dá)率相差無幾。檢測(cè)淋巴結(jié)中MUC1mRNA的表達(dá)，共有9例患者因免疫組化存在微轉(zhuǎn)移而調(diào)整分期；檢測(cè)淋巴結(jié)中MUC2m

9、RNA的表達(dá)，共有9例患者因免疫組化證實(shí)存在微轉(zhuǎn)移而調(diào)整分期。聯(lián)合檢測(cè)淋巴結(jié)中MUC1mRNA和MUC2mRNA，未發(fā)現(xiàn)增加微轉(zhuǎn)移患者檢出率。 3.結(jié)直腸癌合并淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的9例患者有5例在術(shù)后4年內(nèi)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)，而經(jīng)檢測(cè)無合并淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的12例患者中僅有1例出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，前組患者在轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)率上顯著高于后組，(55.6％vs.8.3％，P＜0.05)，早期兩組復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率均很低，差別不大，隨著時(shí)間推移，結(jié)直腸癌合并微轉(zhuǎn)移的患者

10、術(shù)后42月轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的累積風(fēng)險(xiǎn)率為0.2222，無微轉(zhuǎn)移的患者術(shù)后39月轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的累積風(fēng)險(xiǎn)率為0.0417，前者風(fēng)險(xiǎn)率較后者顯著為高(P＜0.05)。 結(jié)論 1.結(jié)直腸癌中黏蛋白MUC1的表達(dá)上調(diào)和/或MUC2的表達(dá)下調(diào)可能參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展。 2.黏蛋白MUC1和MUC2在結(jié)直腸癌區(qū)域淋巴結(jié)中有表達(dá)，且在淋巴結(jié)中的陽性表達(dá)率和淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移率隨Dukes分期上升呈顯著遞增，是檢測(cè)淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的可靠指標(biāo)，可

11、提供結(jié)直腸癌更準(zhǔn)確的分期。免疫組化法聯(lián)合檢測(cè)兩種黏蛋白MUC1和MUC2比分別單獨(dú)檢測(cè)黏蛋白MUC1和MUC2可以增加微轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的檢出率，對(duì)準(zhǔn)確判斷結(jié)直腸癌分期幫助更大。在結(jié)直腸癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移陽性檢出率方面，nestedRT-PCR比IHC更敏感，更有特異性，可以用來檢測(cè)常規(guī)組織學(xué)技術(shù)不易檢測(cè)出來的淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移，是檢測(cè)微轉(zhuǎn)移的可靠方法。 3.小樣本隨訪顯示結(jié)直腸癌合并淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差，仍需大樣本進(jìn)一步研究。