油菜素內(nèi)酯對(duì)巨桉次生生長(zhǎng)影響及轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中相關(guān)基因功能初步分析.pdf

1、油菜素內(nèi)酯(Brassinosteroid，BR)是一種甾醇類植物內(nèi)源激素，廣泛存在于各器官，具有促進(jìn)生長(zhǎng)、提高作物的產(chǎn)量、抗病等生理功能。本研究在桉樹生根培養(yǎng)基上添加油菜素內(nèi)酯發(fā)現(xiàn):低于0.05 mg.L-1的BR可以促進(jìn)巨桉(Eucalyptus grandis)的組培苗生根，而添加高濃度BR時(shí)抑制巨桉的生根，同時(shí)導(dǎo)致生根植株生長(zhǎng)緩慢，組織化學(xué)分析表明0.10mg.L-1的BR抑制生根主要是由于高濃度的BR抑制巨桉基部的形成層細(xì)胞增

2、多，且木質(zhì)化程度增加。通過對(duì)6個(gè)月生桉樹進(jìn)行不同濃度的外施實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，BR濃度達(dá)到20ng.mL-1時(shí)引起木質(zhì)化細(xì)胞的數(shù)量顯著增加，木纖維在新生木質(zhì)部組織中的累積減少，同時(shí)纖維長(zhǎng)度增加。
　　為了進(jìn)一步研究油菜素內(nèi)酯對(duì)桉樹次生維管發(fā)育的作用，本研究選擇了巨桉中油菜素內(nèi)酯受體蛋白BRASSINOSTEROID INSENSITIVE1(BRI1)家族和BRASSINAZOLERESSTANT(BZR)轉(zhuǎn)錄因子家族進(jìn)行進(jìn)一步的研究。利用

3、RT-PCR從巨桉中分別克隆了4個(gè)巨桉BM1基因和4個(gè)巨桉BZR基因。通過對(duì)巨桉BRI1和巨桉BZR家族成員進(jìn)行生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)巨桉BRI1家族蛋白性質(zhì)穩(wěn)定，空間結(jié)構(gòu)復(fù)雜且有較大程度變異，存在信號(hào)肽，該家族蛋白存在3個(gè)motif,同時(shí)BRI1的胞外域包含了24個(gè)富亮氨酸重復(fù)序列（LRR）和一個(gè)位于第20和21個(gè)LRR之間的“島區(qū)域”(ID)，該ID應(yīng)是在細(xì)胞膜上感受外界信號(hào)刺激。巨桉BZR家族空間結(jié)構(gòu)單一，不穩(wěn)定，易與DNA結(jié)合，