菊花主產(chǎn)區(qū)種質(zhì)資源遺傳多樣性研究.pdf

1、菊花為菊科植物菊（Chrysanthemum morifolium Ramat.）的干燥頭狀花序，根據(jù)現(xiàn)代藥理研究證明，菊花有抗氧化、抗癌、抗炎、擴血管等作用，在醫(yī)藥、保健、美容及藥膳等方面應(yīng)用廣泛。由于菊花的品種多樣性豐富，內(nèi)在的化學(xué)成分較為繁多，遺傳關(guān)系比較復(fù)雜等問題，間接阻礙了菊花種質(zhì)資源在遺傳改良上的發(fā)展進程和生產(chǎn)實踐上的有效應(yīng)用。而現(xiàn)今的藥材市場急需一些高多糖、高黃酮等的高產(chǎn)高功效菊花新品種。為此開展了菊花種質(zhì)資源遺傳多樣性評

2、價，以期為選育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)菊花新品種提供有力的科學(xué)依據(jù)，本論文的主要研究結(jié)果如下:
　　1、菊花種質(zhì)資源形態(tài)多樣性研究。通過對20種菊花種質(zhì)資源13個形態(tài)性狀的觀測，結(jié)果表明不同菊花種質(zhì)資源在形態(tài)上差異較大。其中，葉柄長度、葉片鋸齒數(shù)、舌狀花顏色、舌狀花數(shù)量及花層數(shù)這五個性狀的形態(tài)差異最為明顯。經(jīng)菊花形態(tài)的相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)花層數(shù)與葉柄長度、花層數(shù)與葉片鋸齒數(shù)、花層數(shù)與舌狀花數(shù)量間存在顯著的正相關(guān)，為進一步開展菊花遺傳多樣性研究和新品種

3、選育提供依據(jù)。
　　2、菊花種質(zhì)資源化學(xué)成分多樣性研究。系統(tǒng)地分析測定了21種菊花種質(zhì)資源八類有效化學(xué)成分的含量，建立了不同菊花種質(zhì)資源的HPLC指紋圖譜，結(jié)果表明不同菊花種質(zhì)資源的有效化學(xué)成分類型基本相同，但各有效成分在不同菊花種質(zhì)資源間差異明顯。其中，總黃酮、綠原酸、木犀草苷、3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸及揮發(fā)油這五種化學(xué)成分的含量差異較明顯。經(jīng)菊花種質(zhì)資源化學(xué)成分的相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)一些化學(xué)成分間存在一定的關(guān)聯(lián)性，如總黃酮與綠

4、原酸之間、總黃酮與木犀草苷之間等。值得一提的是菊花種質(zhì)資源中的麻城本地菊、小洋菊、金菊及晚貢菊的多種有效成分含量普遍較高。
　　3、基于DNA條形碼的菊花種質(zhì)資源遺傳多樣性研究。利用DNA條形碼ITS2和matK序列，對20種菊花種質(zhì)資源基因組DNA進行PCR擴增，結(jié)果為ITS2序列產(chǎn)生的條帶在500 bp左右;matK序列產(chǎn)生的條帶在750bp-1000bp之間。兩序列比較分析發(fā)現(xiàn)ITS2與matK擴增的序列在不同菊花種質(zhì)資源間

5、差異較小，但ITS2擴增序列的堿基差異相對大于matK序列，表明ITS2序列更有利于菊花DNA遺傳多樣性研究。
　　4、基于ISSR分子標記的菊花種質(zhì)資源遺傳多樣性研究。利用ISSR分子標記技術(shù)，對20種菊花種質(zhì)資源基因組DNA進行PCR擴增，優(yōu)化了ISSR-PCR體系;總體積50 uL，Taq酶2.5U、引物0.4μ mol/L、dNTP0.2 mmol/L、Mg2+1.0 mmol/L、DNA模板50 ng，明確了最佳退火溫度

6、。在80條ISSR通用引物中，成功篩選出21條ISSR引物對菊花DNA基因組進行擴增，共獲得256條條帶，其中多態(tài)性條帶數(shù)有248條，多態(tài)性比率從83.3％-100％不等，說明ISSR引物具有良好的多態(tài)性，可用于菊花種質(zhì)資源遺傳多樣性分析。
　　5、菊花種質(zhì)資源遺傳多樣性綜合分析。通過對菊花種質(zhì)資源的形態(tài)、化學(xué)成分、DNA條形碼及ISSR分子標記進行綜合分析，可得:不同研究方法所得到的聚類結(jié)果都在不同程度上反映出菊花樣本的地域性特