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1、目的:采用瘀熱互結(jié)證和寒凝血瘀證大鼠模型,觀察蘇木對(duì)以上大鼠模型的作用特點(diǎn),研究其雙向適用的特征,探討平性藥蘇木的藥性特征。
方法:1造模:120只大鼠隨機(jī)分為2組,分別為正常組、角叉菜膠加干酵母組,每組10只。角叉菜膠加干酵母組腹腔注射濃度為10mg/mL角叉菜膠溶液,5mL/kg,連續(xù)3天,末次注射角叉菜膠24h后,皮下注射20%的活性干酵母溶液,10mL/kg造成大鼠瘀熱互結(jié)證模型;25只大鼠隨機(jī)分為模型組(n=20)和
2、正常對(duì)照組(n=5),模型組又隨機(jī)分為1.5h、3h、6h、12h4個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只大鼠。除正常組外,其余各組大鼠臵于特制鼠籠內(nèi),然后臵于-18±2℃冰柜連續(xù)冷凍,2h/次,2次/天,連續(xù)7天,造成寒凝血瘀證模型。
2藥效學(xué)研究:72只雄性大鼠隨機(jī)分為5組,分別為正常組、模型組、平性藥蘇木組、寒性藥大黃組、熱性藥三七組,其中模型組24只,其余各組12只。瘀熱互結(jié)證造模完成后,6h后測(cè)量各組大鼠體溫,然后,水合氯醛麻醉大
3、鼠,對(duì)大鼠進(jìn)行圖像采集、量取大鼠全尾長(zhǎng)度和瘀血長(zhǎng)度,選取大鼠的耳廓進(jìn)行微血管流速和流態(tài)的觀察,腹主動(dòng)脈取血5 mL,肝素抗凝,進(jìn)行血流變各項(xiàng)指標(biāo)的觀察;寒凝血瘀證造模最后一次冷凍完12h后,做與熱證相同的指標(biāo)測(cè)定。
3機(jī)理研究:觀察蘇木對(duì)寒、熱兩種血瘀證大鼠血漿中活性物質(zhì)ADP、5-HT、ET的作用特點(diǎn),即腹主動(dòng)脈取血5mL,肝素抗凝,4000rmp/min離心8min后,分離血漿,采用酶聯(lián)免疫吸附法,按照試劑盒說(shuō)明書(shū)中的操作
4、步驟和要求測(cè)定血漿中ADP、5-HT、ET的含量。
結(jié)果:1角叉菜膠加干酵母組大鼠全血高、中、低切黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、血沉方程 K值、紅細(xì)胞電泳時(shí)間、卡松黏度、纖維蛋白原等血流變指標(biāo)均明顯升高,血液呈“濃”、“粘”、“凝”、“聚”狀態(tài),大鼠表現(xiàn)出明顯的“瘀”和“熱”的中醫(yī)表征。全身冷凍的方法建立的寒凝血瘀證大鼠模型在不同的觀察時(shí)間點(diǎn)大鼠均出現(xiàn)畏寒喜暖,蜷縮少動(dòng),朦朧欲睡,唇周發(fā)黑,耳色黯紅,爪尾部紫黯,舌黯紅等寒凝血瘀證的中
5、醫(yī)表征,也出現(xiàn)血液流變性異常、微循環(huán)障礙等實(shí)驗(yàn)室檢查的異常表現(xiàn)。
2平性藥蘇木藥性特征的藥效學(xué)研究
2.1對(duì)瘀熱互結(jié)證和寒凝血瘀證大鼠模型中醫(yī)表征的影響:①瘀熱互結(jié)證:寒性藥大黃能夠降低瘀熱互結(jié)證大鼠體溫,平性藥蘇木、血竭及熱性藥三七對(duì)體溫影響不明顯;平性藥蘇木能夠明顯縮短大鼠尾部瘀血的長(zhǎng)度(p<0.05),熱性藥三七有增加尾部瘀血長(zhǎng)度的趨勢(shì);②寒凝血瘀證:平性藥蘇木對(duì)寒凝血瘀證大鼠的舌質(zhì)顏色R、G、B比值有一定的改
6、善作用或改善趨勢(shì)。
2.2對(duì)瘀熱互結(jié)證和寒凝血瘀證大鼠模型微循環(huán)的影響:①瘀熱互結(jié)證:平性藥蘇木能明顯升高血液流速(p<0.05);寒性藥大黃能明顯升高血液流速(p<0.01);熱性藥三七對(duì)流速和流態(tài)均沒(méi)有明顯改善作用和趨勢(shì)。②寒凝血瘀證:平性藥蘇木能明顯升高血液流速(p<0.05),熱性藥三七有升高趨勢(shì)。
2.3對(duì)瘀熱互結(jié)證和寒凝血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響:①瘀熱互結(jié)證:平性藥蘇木、寒性藥大黃、熱性藥三七均能夠顯著
7、改善血液流變學(xué)狀態(tài)(p<0.01或p<0.05)。②寒凝血瘀證:平性藥蘇木、熱性藥三七均能顯著改善血液流變學(xué)狀態(tài)(p<0.05)。
3平性藥蘇木對(duì)瘀熱互結(jié)證和寒凝血瘀證大鼠活性物質(zhì)作用的研究3.1對(duì)瘀熱互結(jié)證大鼠血漿中ADP、5-HT、ET的影響:蘇木能明顯降低大鼠血漿中的ADP、5-HT的濃度(p<0.01)。
3.2對(duì)寒凝血瘀證大鼠血漿中ADP、5-HT、ET的影響:蘇木能明顯降低大鼠血漿中5-HT的濃度(p<0
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